Lee este artículo en:

Diagnóstico laboratorial: Ileitis (Lawsonia intracellularis)

¿Qué métodos de diagnóstico laboratorial puedo usar para diagnosticar ileitis? ¿Cuál debo elegir según la situación? ¿Cómo interpreto los resultados?

Test disponibles:

Patología macroscópica

  • Evalúa la presencia de lesiones en tejidos que pueden sugerir la presencia de enfermedad.
  • Ubicación de las lesiones: íleon terminal (a veces puede incluir el ciego).
  • Existen 3 formas muy distintas de la enfermedad:
    • Enteropatía hemorrágica proliferativa (aguda/hiperaguda).
      • Engrosamiento de la mucosa intestinal.
      • Contenido hemorrágico con coágulos.

Imagen 1. Íleon de cerdo con ileitis hiperaguda que muestra intestinos ligeramente distendidos con contenido intestinal hemorrágico mezclado con un poco de alimento parcialmente digerido.

Imagen 1. Íleon de cerdo con ileitis hiperaguda que muestra intestinos ligeramente distendidos con contenido intestinal hemorrágico mezclado con un poco de alimento parcialmente digerido.

  • Adenomatosis intestinal porcina (crónica sin complicaciones):
    • Engrosamiento intestinal corrugado severo.
    • Normalmente sin sangre.

Imagen 2. Intestino delgado ligeramente ondulado (debido al engrosamiento de la pared intestinal) que sugiere una ileitis leve a moderadamente crónica y sin complicaciones. Si abriéramos los intestinos, el engrosamiento y la ondulación se volverían más evidentes.

Imagen 2. Intestino delgado ligeramente ondulado (debido al engrosamiento de la pared intestinal) que sugiere una ileitis leve a moderadamente crónica y sin complicaciones. Si abriéramos los intestinos, el engrosamiento y la ondulación se volverían más evidentes.

  • Enteritis necrótica (crónica con complicaciones):
    • Engrosamiento intestinal corrugado severo.
    • Membrana fibrinonecrótica sobre el intestino engrosado.
    • Normalmente sin sangre.

Imagen 3. Íleon de cerdo con una membrana necrótica adherida a la superficie de la mucosa intestinal.

Imagen 3. Íleon de cerdo con una membrana necrótica adherida a la superficie de la mucosa intestinal.

  • Pros:
    • El diagnóstico presuntivo se puede realizar después de un examen macroscópico de los intestinos.
    • Puede diferenciar las 3 formas distintas de la enfermedad.
  • Contras:
    • Las lesiones no son exclusivas/diagnósticas de ileitis; otras enfermedades pueden causar lesiones similares.
    • La evaluación del engrosamiento puede ser subjetiva, especialmente cuando las contracciones intestinales hacen que las paredes intestinales parezcan temporalmente más gruesas de lo normal.

Histopatología

  • Evalúa la presencia de lesiones en tejidos (engrosamiento) que pueden confirmar la presencia de enfermedad.
  • Tipo de muestra: tejidos.
  • Pros:
    • Las lesiones histopatológicas son casi diagnósticas:
      • Se puede confirmar la presencia de proliferación de células epiteliales inmaduras de las criptas.
      • Infiltración de células inflamatorias mínima o nula.
    • Puede detectar formas leves de la enfermedad.
  • Contras:
    • Se necesita fijar con formol los tejidos intestinales de animales muertos recientemente.
    • A veces, la enfermedad puede ser segmentaria, especialmente en las primeras etapas.

Inmunohistoquímica (IHC)

  • Detecta la presencia de antígeno bacteriano.
  • Tipo de muestra: tejidos.
  • Pros:
    • Criterio de referencia.
    • Detecta bacterias en el sitio de la lesión (buena prueba de causalidad).
    • Puede identificar cantidades bajas, moderadas o altas de bacterias presentes.
  • Contras:
    • Requiere que haya una cantidad de bacterias significativamente mayor que la PCR.

Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)

  • Detecta la presencia de secuencias específicas de ácido nucleico bacteriano (ADN).
  • Tipos de muestras: tejidos intestinales, hisopos fecales, heces.
  • Pros:
    • Alta sensibilidad.
    • La cuantificación por PCR se asocia con la presencia de lesiones.
    • Coste moderado:
      • A menudo se pueden combinar muestras de heces o tejidos para reducir el coste y minimizar la pérdida de sensibilidad (especialmente en lo que respecta a la relevancia clínica).
  • Contras:
    • Alta sensibilidad – confirma la presencia de bacterias pero no la enfermedad.
    • No diferencia entre bacteria de vacuna viva e infección por bacteria de campo.

Ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA)

  • Detecta la presencia de anticuerpos.
  • Tipo de muestra: suero.
  • Pros:
    • Los animales permanecen positivos durante varias semanas.
    • Puede utilizarse en casos crónicos.
    • Mayor sensibilidad de diagnóstico que la prueba de anticuerpos fluorescentes indirectos (IFA).
  • Contras:
    • Los anticuerpos específicos y el momento de la detección pueden variar ligeramente entre los distintos kits comerciales disponibles.
    • ​​​​​​​Los animales tardan entre 2 y 4 semanas, según la carga bacteriana, en volverse seropositivos.
    • No diferencia entre bacteria de vacuna viva e infección por bacteria de campo.

Anticuerpos fluorescentes indirectos (IFA)

  • Detecta la presencia de anticuerpos.
  • Tipo de muestra: suero.
  • Pros:
    • Los animales permanecen positivos durante varias semanas.
    • ​​​​​​​Puede utilizarse en casos crónicos.
  • Contras:
    • ​​​​​​​Menor sensibilidad de diagnóstico que ELISA.
    • No es factible para un gran número de muestras.
    • ​​​​​​​Los animales tardan entre 2 y 4 semanas, según la carga bacteriana, en volverse seropositivos.
    • No diferencia entre bacteria de vacuna viva e infección por bacteria de campo.
    • La fiabilidad depende mucho de la habilidad de los técnicos.

Interpretación de resultados:

Patología macroscópica

  • Positivo: A menudo, el diagnóstico presuntivo es suficiente.
  • Negativo: Sin lesiones intestinales macroscópicas.

Histopatología

  • Positivo: Fuerte asociación entre engrosamiento y enfermedad.
  • Negativo: Sin lesiones intestinales.

IHC

  • Positivo: La bacteria está presente en el sitio de la lesión.
  • Negativo: Negativo o infección demasiado reciente (bacteria de crecimiento lento) o demasiado antigua para detectar la bacteria.

PCR

  • Positivo:
    • Ct <20 fuerte vínculo con lesiones intestinales (IHC) y enfermedad.
    • Ct>30 indica presencia del microorganismo pero no se asocia con lesiones intestinales (IHC negativo) y, por lo tanto, es probable que no tenga un impacto económico en ese momento.
  • Negativo: Negativo o la bacteria no se detecta si la prueba se realiza demasiado pronto (bacteria de crecimiento lento) o mucho después de la infección.

ELISA

  • Positivo: Exposición anterior (> 2-4 semanas) a vacuna o bacteria de campo.
  • Negativo:
    • Negativo a vacuna o bacteria de campo.
    • Infección demasiado reciente para ser detectada (bacteria de crecimiento lento).
    • El uso de antibióticos puede inhibir el crecimiento bacteriano y disminuir la respuesta inmunitaria.

IFA

  • Positivo: Exposición anterior (> 2-4 semanas) a vacuna o bacteria de campo.
  • Negativo:
    • Negativo a vacuna o bacteria de campo.
    • Infección demasiado reciente para ser detectada (bacteria de crecimiento lento).
    • El uso de antibióticos puede inhibir el crecimiento bacteriano y disminuir la respuesta inmunitaria.

Escenarios:

Cerdos de engorde con diarrea (aguda o crónica):

  • Recoge muestras fecales de 10 o más cerdos con diarrea no tratados con antibióticos y envíalos para PCR en pooles de 5.
  • Necropsia 1-3 cerdos muertos recientemente o eutanasia cerdos con diarrea. Evalúa macroscópicamente el íleon terminal en busca de engrosamiento. Recoge una muestra de íleon y fíjala en solución de formol para histopatología y IHC.

Cerdos de engorde que no están creciendo (crónico):

  • Necropsia 1-3 cerdos muertos recientemente o eutanasia cerdos con diarrea. Evalúa macroscópicamente el íleon terminal en busca de engrosamiento. Recoge una muestra de íleon y fíjala en solución de formol para histopatología y IHC.

Determinación del momento de exposición:

  • Recoge muestras de 10-15 cerdos a las 8, 11, 14 y 17 semanas de edad:
    • Dos enfoques para el muestreo:
      • Transversal – recoge de diferentes grupos de edad a la vez (se obtienen resultados más rápido).
      • Longitudinal – recoge de los mismos cerdos a lo largo del tiempo (se obtienen resultados más precisos).
    • ​​​​​​​Análisis de muestras de suero mediante ELISA (preferible) o IFA.
    • ​​​​​​​Análisis de muestras fecales mediante PCR en pools de 5.

Comentarios del artículo

Este espacio no está orientado a ser una zona de consultas a los autores de los artículos sino que pretende ser un lugar de discusión abierto a todos los usuarios de 3tres3
Publica un nuevo comentario

Para comentar debes registrarte en 3tres3 y acceder como usuario.

Artículos relacionados