Diagnóstico laboratorial: Disentería porcina (Brachyspira hyodysenteriae)

Test disponibles:

Cultivo bacteriano

• Aislamiento de organismos vivos.
• Tipo de muestra: heces.
• Pros:
  • Relativamente barato.
  • La presencia de Brachyspira spp. fuertemente beta-hemolíticas está asociada a la virulencia.

Tabla 1: Relación entre la beta-hemólisis en Brachyspira spp. y la enfermedad.

• Contras:
  • Más sensible que la prueba PCR.
  • Crecimiento lento (hasta 10 días).
  • Requiere cultivo anaerobio.
  • Algunas cepas menos virulentas pueden encontrarse en granjas sin signos clínicos o lesiones.

Susceptibilidad antimicrobiana

• Test in vitro: capacidad de un organismo vivo para crecer bajo concentraciones específicas de diferentes antimicrobianos.
• Tipo de muestra: heces.
• Pros:
  • Identificación de susceptibilidad o resistencia de cepas específicas a antimicrobianos comunes.
• Contras:
  • Requiere un aislado bacteriano.
  • Las pruebas in vitro pueden diferir ligeramente de los resultados in vivo.
  • Es posible que algunos antimicrobianos específicos no se incluyan o requieran pruebas especiales separadas.
  • Coste moderado.
  • Los resultados tardan 7 días.

Histopatología

• Evalúa la presencia de lesiones en tejidos que pueden confirmar la presencia de enfermedad.
• Tipo de muestra: tejidos.
• Pros:
  • Las lesiones histopatológicas pueden ser muy sugestivas si se encuentran muchas espiroquetas cerca de las lesiones intestinales.
  • Puede detectar formas leves de la enfermedad.
• Contras:
  • Se necesita fijar con formol los tejidos intestinales de un animal muerto recientemente.
  • Las lesiones son similares a otras enfermedades.

Frotis de impresión

• Detecta la presencia de bacterias.
• Tipos de muestra: tejido del intestino grueso, heces.
• Pros:
  • Fácil de realizar.
    • Tinción no específica.
    • Microscopía de campo oscuro.
  • Se puede hacer un diagnóstico presuntivo detectando un gran número de espiroquetas.

    

  • Puede identificar cantidades bajas, moderadas o altas de bacterias presentes.
• Contras:
  • Requiere la presencia de un número significativamente mayor de bacterias en comparación con el cultivo o la PCR.
  • No evalúa la capacidad hemolítica de los aislados y, por lo tanto, no diferencia entre cepas no patógenas, colitis por espiroquetas y disentería porcina.

Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)

• Detecta la presencia de una secuencia específica de ácido nucleico bacteriano (ADN).
• Tipos de muestra: tejido intestinal, hisopos fecales, heces.
• Pros:
  • Alta sensibilidad.
  • La cuantificación por PCR se asocia con la presencia de lesiones.
  • Coste moderado.
    • A menudo se pueden combinar muestras de heces o tejidos para reducir el coste y minimizar la pérdida de sensibilidad (especialmente en lo que respecta a la relevancia clínica).
• Contras:
  • Alta sensibilidad – confirma la presencia de bacteria pero no de enfermedad.
  • Se necesitan primers (cebadores) adecuados para detectar y diferenciar entre Brachyspira spp.

Ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA)

• Detecta la presencia de anticuerpos.
• Tipo de muestra: suero.
• Pros:
  • Puede detectar la infección a nivel de explotación.
  • Los anticuerpos pueden durar varios meses.
  • Los niveles séricos de IgG se correlacionan con la duración de los signos clínicos.
• Contras:
  • Las pruebas no se consiguen fácilmente.
  • Baja sensibilidad y especificidad.
    • Se utilizan para la detección a nivel de explotación y no para el diagnóstico individual de los animales.
  • Los anticuerpos específicos y el momento de la detección pueden variar ligeramente entre los distintos kits comerciales disponibles.
  • A menudo, los antígenos utilizados pueden ser específicos de especies concretas de Brachyspira.
  • No existe correlación entre los niveles de anticuerpos y la protección.
  • Se desconoce la protección cruzada entre Brachyspira spp.

Interpretación de resultados:

Cultivo bacteriano

• Positivo: bacteria presente.
  • Beta-hemólisis fuerte – disentería porcina.
  • Beta-hemólisis débil – colitis por espiroquetas o no patógena.
• Negativo: Negativo, animal posiblemente tratado previamente con antibióticos o demasiado tarde en la infección.

Susceptibilidad antimicrobiana

• Susceptible: posible buena elección para el tratamiento si el antimicrobiano puede llegar al tejido diana.
• Resistente: hay que seleccionar un antimicrobiano diferente.
• MIC: si se realiza la MIC (mínima concentración inhibitoria) hay que asegurarse que el antimicrobiano seleccionado alcanza el valor MIC indicado en el órgano diana.

Histopatología

• Positivo: Las espiroquetas encontradas cerca de las lesiones son un diagnóstico presuntivo.
• Negativo: No hay lesiones intestinales.

Frotis de impresión

• Cantidad de espiroquetas presentes:
  • Alta: muy sugestivo de enfermedad.
  • Moderada: interpretación variable.
  • Baja: valor dudoso (podría tratarse de una condición no patógena o crónica)
  • No presente: animal posiblemente tratado previamente con antibióticos o contribuyente no significativo.

PCR

• Positivo: confirma la presencia de bacteria.
• Negativo: Negativo o infección demasiado antigua para detectar la bacteria o animal tratado previamente con antibióticos.

ELISA

• Positivo: Exposición anterior (>2-4 semanas) a vacuna o bacteria de campo.
• Negativo:
  • Negativo a vacuna o bacteria de campo.
  • Infección demasiado antigua para detectarla.
  • El uso de antibióticos puede inhibir el crecimiento bacteriano y disminuir la respuesta inmunitaria.

Escenarios:

Cerdos de engorde con diarrea (aguda)

• Recoge muestras fecales de 10 o más cerdos con diarrea no tratados con antibióticos y envíalas para cultivo bacteriano y PCR en pooles de 5.
• Necropsia 1-3 cerdos muertos recientemente o eutanasia cerdos con diarrea. Evalúa macroscópicamente el intestino grueso (especialmente el ciego y colon espiral) y fija en formol para histopatología.

Antecedentes crónicos de diagnóstico de disentería porcina pero sin signos clínicos observados

• Recoge muestras de heces de 4-6 corrales y envíalas para PCR.
• Recoge muestras de 15-20 cerdos a las 14 y 18 semanas de edad.
  • Dos enfoques para la recogida:
    • Transversal – recoge de diferentes grupos de edad a la vez (se obtienen resultados más rápido).
    • Longitudinal – recoge de los mismos cerdos a lo largo del tiempo (se obtienen resultados más precisos).
  • Análisis de muestras de suero mediante ELISA.