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La terapia génica fetal in utero (IUFGT, por sus siglas en inglés) tiene el potencial de corregir trastornos monogénicos graves antes de que se produzcan daños irreversibles. A pesar de los resultados prometedores en modelos animales pequeños y grandes, su aplicación a la práctica clínica sigue limitada por dificultades técnicas, problemas de seguridad y falta de protocolos estandarizados en especies modelo relevantes para la enfermedad.
Métodos: Se estableció y validó un enfoque mínimamente invasivo, guiado por ecografía, para la administración sistémica de genes en fetos de cerdos utilizando un vector AAV9 autocomplementario que codifica GFP bajo un promotor CAG. Las inyecciones se realizaron a diferentes edades gestacionales (EG 80 y EG 108) por vía intracardíaca o venosa umbilical. Se monitorizaron los resultados postnatales y se evaluaron la biodistribución y expresión de transgenes mediante qPCR, ddPCR, inmunofluorescencia y Western blot. La respuesta inflamatoria, la toxicidad y la seguridad materna se analizaron mediante perfiles de citoquinas y análisis histológicos.
Resultados: El procedimiento fue bien tolerado, sin morbilidad materna significativa ni resultados obstétricos adversos, salvo un parto prematuro. El análisis de biodistribución reveló una amplia presencia del vector en tejidos periféricos, con una expresión robusta de GFP en hígado y corazón. Cabe destacar que no se observó toxicidad tisular significativa, necrosis ni fibrosis en ninguno de los órganos analizados. Se detectaron leves aumentos de citoquinas proinflamatorias (GM-CSF, GRO-α, IFN-γ), aunque no se asociaron con cambios histopatológicos. No se detectaron anticuerpos anticápside de AAV9 en el suero de los lechones y las cerdas, lo que sugiere una respuesta inmunitaria mínima frente al vector.
Conclusión: Estos hallazgos demuestran la seguridad, viabilidad y eficacia de la IUFGT guiada por ecografía en cerdos, lo que respalda su potencial como plataforma translacional para la terapia génica en fetos afectados por enfermedades congénitas graves. Este modelo ofrece un marco valioso para el desarrollo preclínico de intervenciones prenatales, en particular para trastornos de inicio temprano, como las enfermedades mitocondriales.
Di Donfrancesco, A., Adelizzi, A., Giri, A. et al. Transabdominal ultrasound guided AAV9-GFP delivery in fetal pigs: a translational and minimally invasive model for in utero fetal gene therapy. Gene Ther 32, 487–496 (2025). https://doi.org/10.1038/s41434-025-00551-8
