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A terapia gênica fetal intrauterina (IUFGT, na sigla em inglês) tem o potencial de corrigir distúrbios monogênicos graves antes que danos irreversíveis ocorram. Apesar dos resultados promissores em modelos animais pequenos e grandes, sua aplicação clínica ainda é limitada por dificuldades técnicas, questões de segurança e falta de protocolos padronizados em espécies modelo relevantes para a doença.
Métodos: Foi estabelecido e validado um método minimamente invasivo guiado por ultrassom para administração sistêmica de genes em fetos suínos, usando um vetor AAV9 autocomplementar que codifica GFP sob o promotor CAG. As injeções foram realizadas em diferentes idades gestacionais (EG 80 e EG 108) por via intracardíaca ou via veia umbilical. Os resultados pós-natais foram monitorados, e a biodistribuição e expressão do transgene foram avaliadas por qPCR, ddPCR, imunofluorescência e Western blot. A resposta inflamatória, toxicidade e segurança materna foram analisadas por perfis de citocinas e exames histológicos.
Resultados: O procedimento foi bem tolerado, sem morbidade materna significativa ou desfechos obstétricos adversos, exceto um parto prematuro. A análise de biodistribuição mostrou ampla presença do vetor em tecidos periféricos, com expressão robusta de GFP no fígado e coração. Não foi observada toxicidade tecidual significativa, necrose ou fibrose em nenhum dos órgãos analisados. Houve leves aumentos de citocinas pró-inflamatórias (GM-CSF, GRO-α, IFN-γ), mas sem alterações histopatológicas associadas. Não foram detectados anticorpos contra a cápside do AAV9 no soro dos leitões ou das fêmeas, sugerindo resposta imunológica mínima ao vetor.
Conclusão: Estes achados demonstram a segurança, viabilidade e eficácia da IUFGT guiada por ultrassom em suínos, reforçando seu potencial como plataforma translacional para terapia gênica em fetos com doenças congênitas graves. Este modelo fornece um quadro valioso para o desenvolvimento pré-clínico de intervenções prenatais, especialmente para distúrbios de início precoce, como doenças mitocondriais.
Di Donfrancesco, A., Adelizzi, A., Giri, A. et al. Transabdominal ultrasound guided AAV9-GFP delivery in fetal pigs: a translational and minimally invasive model for in utero fetal gene therapy. Gene Ther 32, 487–496 (2025). https://doi.org/10.1038/s41434-025-00551-8
