Diagnostic de laboratoire : Actinobacillus pleuropneumoniae (APP).

Tests disponibles:

Pathologie macroscopique

• Évalue la présence de lésions dans les tissus qui peuvent presque constituer un diagnostic de la maladie.
• Localisation des lésions : poumon.
• Zones de consolidation nécro-hémorragique dans le poumon accompagnées d'une pleurite fibrineuse (figure 1).

• Avantages :
  • Un diagnostic présomptif peut être établi après un examen macroscopique des poumons.
• Inconvénients :
  • Actinobacillus suis peut provoquer des lésions similaires mais moins graves.
  • Ne permet pas d'identifier le sérotype.

Culture bactérienne

• Isolement d'organismes vivants.
• Types d'échantillons : poumon.
• Avantages :
  • Peut être réalisée dans n'importe quel laboratoire (y compris en interne).
  • Le biotype I nécessite du NAD (généralement fourni par une colonie cultivée de Staphylococcus aureus).
  • Le biotype II ne nécessite pas de NAD.
  • Coût relativement faible.
• Inconvénients :
  • Pas toujours facile à cultiver.
  • Ne permet pas d'identifier le sérotype.
  • Si les porcs ont été préalablement traités avec des antibiotiques, cela peut entraver la croissance de la bactérie.

Sensibilité aux antimicrobiens (antibiogramme)

• Test in vitro : capacité d'un organisme vivant à se développer sous des concentrations spécifiques de différents antimicrobiens.
• Types d'échantillons : poumon.
• Avantages :
  • Identification de la sensibilité ou de la résistance de souches spécifiques à des antimicrobiens courants.
  • Identification des tendances en matière de résistance aux antimicrobiens.
• Inconvénients :
  • Nécessite un isolat bactérien.
  • Les tests in vitro peuvent différer légèrement des résultats in vivo.
  • Certains antimicrobiens spécifiques peuvent ne pas être inclus ou nécessiter des tests spéciaux distincts.
  • Coût modéré.

Polymerase Chain Reaction(PCR) Générale ou sérotypage

• Détecte la présence de séquences d'acide nucléique (ADN) bactériennes spécifiques.
• Types d'échantillons : poumons et amygdales.
• Avantages :
  • Haute sensibilité.
  • Générale
    • Cible les gènes de la toxine ApxIV.
    • Présents dans tous les sérotypes APP.
  • Sérotypage
    • Cible différentes parties des gènes des toxines ApxI, ApxII et ApxIII.
    • Voir le tableau 1 pour le sérotypage et la production de toxines.
  • Coût modéré.
    • Les échantillons de tissus peuvent souvent être regroupés pour réduire les coûts et minimiser la perte de sensibilité.
• Inconvénients :
  • Nécessite plusieurs amorces spécifiques pour déterminer le sérotype.
  • Toutes les souches ne peuvent pas être typées.
    • Il existe actuellement 19 sérotypes identifiés et ce nombre va continuer à augmenter.
  • Tous les tests ne sont pas validés pour les échantillons d'amygdales.

Tableau 1 : Production de toxines pour chaque sérotype.

	Production de toxines
Sérotype	ApxI	ApxII	ApxIII	ApxIV
1	X	X		X
2		X	X	X
3		X	X	X
4		X	X	X
5	X	X		X
6		X	X	X
7		X		X
8		X	X	X
9	X	X		X
10	X			X
11	X	X		X
12		X		X
13		X		X
14	X			X
15		X	X	X
16	X	X		X
17		X		X
18		X		X
19		X		X

Test d'immuno-absorption enzymatique (ELISA) Antigène LPS-O

• Détecte la présence d'anticorps.
• Types d'échantillons : sérum.
• Cible : antigène LPS-O.
• Avantages :
  • Peut être utile pour aider au sérotypage.
  • Sensibilité élevée.
• Inconvénients :
  • Importante réactivité croisée entre les sérotypes en raison du partage des épitopes capsulaires et de l'antigène LPS-O.
  • Les sérotypes suivants présentent une réaction croisée en raison du partage des antigènes LPS-O :
  • Réaction croisée entre les sérotypes 1, 9 et 11.
  • Réaction croisée entre les sérotypes 3, 6, 8, 15, 17 et 19.
  • Réaction croisée entre les sérotypes 4, 7 et 18.
  • Ne permet pas de déterminer le sérotype spécifique avec un seul test.
  • Très coûteux et peu pratique pour tester tous les sérotypes.

Test d'immuno-absorption enzymatique (ELISA) Antigène ApxIV

• Détecte la présence d'anticorps.
• Types d'échantillons : sérum.
• Cible : antigène ApxIV.
• Avantages :
  • Haute sensibilité.
  • Détecte tous les sérotypes d'APP.
• Inconvénients :
  • Ne détermine pas le sérotype spécifique.
  • Ne détermine pas la virulence des souches.

Interprétation des résultats :

Pathologie macroscopique

• Positif : le diagnostic de présomption est souvent suffisant.
• Négative : pas de lésions pulmonaires macroscopiques.

Culture bactérienne

• Positive :
  • Biotype 1 : NAD-dépendant.
  • Biotype 2 : indépendant du NAD.
• Négative : Négative ou animal éventuellement traité antérieurement avec des antibiotiques.

Sensibilité aux antimicrobiens (antibiogramme)

• Sensible : bon choix de traitement possible si l'antimicrobien peut atteindre le tissu cible.
• Résistant : un autre antimicrobien doit être choisi.
• CMI : si la CMI (concentration minimale inhibitrice) est réalisée, assurez-vous que l'antimicrobien sélectionné atteint la valeur CMI indiquée dans l'organe cible.

PCR

• Positive :
  • Présence du micro-organisme.
  • Permet d'identifier la présence de différents gènes qui facilitent le sérotypage.
• Négative :
  • Négatif ou infection trop ancienne.
  • L'animal a peut-être déjà été traité avec des antibiotiques.
  • Toutes les souches ne peuvent pas être sérotypées (non typables).

ELISA Antigène LPS-O

• Positif : aide à déterminer le sérotype ou à identifier un groupe de sérotypes.
• Négatif : négatif, l'infection est trop ancienne ou l'animal a peut-être déjà été traité avec des antibiotiques.

ELISA Antigène ApxIV

• Positif : présence du germe.
• Négatif : négatif, infection trop ancienne ou animal éventuellement déjà traité aux antibiotiques.

Scénarios :

Porcs charcutiers présentant une mort subite ou une maladie respiratoire (aiguë)

• Procéder à l'autopsie de 1 à 3 porcs morts récemment ou euthanasier les porcs qui toussent. Évaluer macroscopiquement les poumons pour détecter les zones de consolidation nécro-hémorragique accompagnées d'une pleurite fibrineuse.
• Envoyer les poumons atteints en vue d'une culture bactérienne et d'un test PCR général pour l'APP et, en cas de résultat positif, effectuer une PCR de sérotypage.

Établir le statut négatif de l'élevage

• Prélever un échantillon de 30 des plus gros porcs en engraissement de l'élevage et les tester 2 à 3 fois par an à l'aide de l’ELISA ApxIV .