Diagnostic de laboratoire : maladie de l'œdème

Test disponibles

Culture bactérienne

• Isolement des organismes vivants.
• Type d'échantillon : féces, contenu intestinal.
• Avantages :
  • Les bactéries se développent facilement en 1 jour.
  • Facile à faire dans n'importe quel laboratoire (même interne).
  • Coût relativement bas.
• Inconvénients:
  • Certains E. coli font partie de la flore intestinale normale.
  • Les porcs ont plusieurs E. coli en même temps.
  • Si les porcs ont déjà été traités avec des antibiotiques, cela peut empêcher la croissance bactérienne.

Sensibilité aux antimicrobiens (antibiogramme)

• Test in vitro : capacité d'un organisme vivant à se développer sous des concentrations spécifiques de différents antimicrobiens.
• Type d'échantillons : féces, contenu intestinal.
• Avantages :
  • Identification de la sensibilité ou de la résistance de souches spécifiques aux antimicrobiens courants.
  • Identification des tendances de la résistance aux antimicrobiens.
  • Coût modéré.
• Inconvénients:
  • Nécessite un isolat bactérien.
  • Les tests in vitro peuvent différer légèrement des résultats in vivo.
  • Certains antimicrobiens spécifiques peuvent ne pas être inclus ou nécessiter des tests spéciaux séparés.

Histopathologie

• Évalue la présence de lésions tissulaires (dommages) qui peuvent confirmer la présence d'une maladie. Parfois, la présence d'organismes peut également être détectée directement (bactéries et parasites) ou indirectement (virus) à l'aide de colorants spéciaux supplémentaires.
• Type d'échantillon : tissus.
• Avantages :
  • Associe l'adhésion bactérienne aux dommages intestinaux.
  • Aucune coloration spéciale n'est nécessaire.
• Inconvénients :
  • Les tissus intestinaux doivent être fixés au formol dans les 15 minutes suivant la mort de l'animal car le tissu intestinal se décompose rapidement.
  • La maladie peut être segmentaire, de sorte que plusieurs échantillons intestinaux doivent être envoyés.

Génotypage

• Une technique PCR (Polymérase Chain réaction) qui détecte la présence d'une séquence spécifique d'acides nucléiques (ADN) associée à des gènes de virulence connus.
• Avantages :
  • Réalisé par PCR ; facile à faire.
  • Aide à identifier la pathogénicité en détectant la présence de gènes (pas nécessairement l'expression génique) associés à des facteurs de virulence.
  • Gènes de toxines : EAST1, LT, STa, STb, Stx1, Stx2, Stx2e.
  • Gènes de pili : F18, F41, K88 (F4), K99 (F5), 987P (F6).
  • Gènes d'adhésines : AIDA, EAEA, PAA
  • Facilite la sélection appropriée des vaccins (en fonction des pili).
  • Cela aide à confirmer que l'isolat a des gènes pour la maladie de l'œdème.

Gènes d'E. Coli détectés par génotypage PCR et par leur fonction. Les gènes surlignés en rouge sont importants pour le diagnostic de la maladie de l'œdème.

Gène	Type	Description
EAST1	Toxine	La toxine intestinale se lie au même récepteur et stimule la même voie sécrétoire que Sta (la cause de la diarrhée n'est pas bien établie)
LT	Toxine	Toxine intestinale qui stimule la sécrétion intestinale
STa	Toxine	Toxine intestinale qui stimule la sécrétion intestinale principalement chez les jeunes porcs (diminue l'absorption d'eau et d'électrolytes)
STb	Toxine	Toxine intestinale qui stimule une diarrhée sécrétoire principalement chez les porcs âgés (augmente la sécrétion des entérocytes)
Stx1	Toxine	La toxine intestinale peut être trouvée dans des souches pathogènes et non pathogènes
Stx2	Toxine	La toxine intestinale peut être trouvée dans des souches pathogènes et non pathogènes
Stx2e	Toxine	Toxine systémique qui induit des lésions vasculaires et la maladie de l'œdème
F18 (F107)	Adhésine	Pili (fimbria) utilisé pour l'attachement qui est présent après l'âge de 20 jours et généralement associé à la diarrhée post-sevrage et à la maladie de l'œdème
F41	Adhésine	Pili (fimbria) utilisé pour l'adhésion principalement chez les nouveau-nés
K88 (F4)	Adhésine	Pili (fimbria) utilisée pour l'adhésion de la naissance à tous les âges
K99 (F5)	Adhésine	Pili (fimbria) utilisé pour l'adhésion principalement chez les nouveau-nés
987P (F6)	Adhésine	Pili (fimbria) utilisé pour l'adhésion principalement chez les nouveau-nés
AIDA	Adhésine	"Adhésine impliquée dans l'adhésion diffuse" non fimbriale, le plus souvent associée à F18
EAE	Adhésine	Adhésine non fimbriale contribuant à des lésions d'adhésion et d'effacement ("attaching-and-effacing")
PAA	Adhésine	Adhésine non fimbriale essentielle pour que se produisent les lésions d'adhésion et d'effacement ("attaching-and-effacing")

• Inconvénients:
  • Nécessite un isolement bactérien.
  • Les porcs peuvent avoir plus d'une souche à la fois, nous devons donc être sûrs d'avoir isolé la bonne souche.
  • Prix ​​modéré, mais généralement un seul isolat est testé.

Interprétation des résultats :

Culture bactérienne :

• Ce doit être un E. coli hémolytique.

• Pureté :
  • Croissance pure : suggérant hautement qu'il contribue à la maladie.
  • Croissance mixte : valeur discutable.
• Quantité :
  • Élevée : suggérant hautement qu'il contribue à la maladie.
  • Modérée : interprétation variable.
  • Faible : valeur douteuse (pourrait être un contaminant).
  • Pas de croissance : Animal éventuellement préalablement traité avec des antibiotiques ou agent sans contribution significative.

Sensibilité aux antimicrobiens (antibiogramme) :

• Sensible : bon choix de traitement possible si l'antimicrobien peut atteindre le tissu cible.
• Résistant : un autre antimicrobien doit être sélectionné.
• CMI : si une CMI (concentration minimale inhibitrice) est effectuée, s'assurer que l'antimicrobien sélectionné atteint la valeur CMI indiquée dans l'organe cible.

Histopathologie :

• Positive : association causale forte si on est capable de démontrer des lésions intestinales avec E. coli adhérant aux cellules épithéliales.
• Négative : aucune lésion intestinale.

Génotypage :

• Le génotypage est nécessaire pour confirmer que l'isolat a des facteurs de virulence associés à la maladie de l'œdème.
  • Ce doit être F4 ou F18.
  • Il doit contenir la toxine de type shiga (Stx2e).

Scénario
Porcs souffrant de diarrhée post-sevrage :

• Prélever des écouvillons rectaux de 2 porcs ou plus souffrant de diarrhée, non traités avec des antibiotiques et les envoyer pour culture bactérienne, antibiogramme et génotypage.
• Euthanasier 1 à 3 porcelets souffrant de diarrhée qui n'ont pas reçu de traitement. Prélever immédiatement 3 échantillons d'intestin de chaque porcelet et les placer dans une solution de formaldéhyde. Prélever des échantillons intestinaux frais pour les envoyer réfrigérés pour culture bactériologique, antibiogramme et génotypage.