Капсулированное семя хряков: его сохранность, кинетические характеристики после высвобождения, передвижение по половым путям и результаты практического применения.

Raúl Sánchez Sánchez
07-Дек-2015 (назад 10 года 4 месяцы 28 дни)

Оценка возможных вариантов использования капсулированного (включенного в желатиновую капсулу) семени для искусственного осеменения (ИО) свиноматок проводилась путем сравнения того, как на различных этапах этого процесса ведут себя капсулированные (К) и некапсулированные (НК) спермодозы, полученные из эякулята. (Sánchez-Sánchez и др., 2014).

На начальном этапе исследования сравнивалось, как дозы, относящиеся к обеим группам, переносят хранение в течение пяти дней, будучи охлажденными до 150С. Сравнение параметров семени не показало каких-либо заметных отличий.

Одним из самых интересных свойств капсулированного семени является постепенное высвобождение его клеток из капсулы. Для оценки этого процесса in vitro образцы семени обеих групп (К и НК) были подвергнуты процедуре модифицированного всплывания, при этом производилась оценка концентраций сперматозоидов, достигших верхней части контейнера, в котором указанные образцы на протяжении 7 часов подвергались культивации при температуре 370С. Уже в первые часы культивации была отмечена более высокая концентрация сперматозоидов в сперме из НК группы, в то время, как в группе К сперматозоидов практически не было заметно вовсе. Группа НК демонстрирует высокую концентрацию сперматозоидов, которая затем резко падает, после чего сохраняет относительную стабильность, но в следующие 3 часа опять заметно снижается. В то же время, в группе К начинается повышение концентрации, хотя и заметно более умеренное, которое достигает пика (не такого выраженного, как в группе НК), вслед за чем отмечается стабилизация и более высокая, в сравнении с некапсулированным семенем, концентрация в течение последних 3-х часов.

Для того, чтобы изучить поведение капсулированных спермадоз в половых путях свиноматки, был синхронизированы эструсы 6 свиноматок, объединенных в группу. Спермадозы для их осеменения были приготовлены из одного эякулята, обработанного таким образом, чтобы получить порции К и НК семени объемом 95 мл с концентрацией 3 х 109 сперматозоидов каждая. Одни свиноматки были подвергнуты двукратному осеменению дозами НК, а другие – однократному (проведенному одновременно со вторым осеменением свиноматок первой группы) дозой К. Через 8 часов все они были подвергнуты забою и была проведена оценка распределения сперматозоидов в их половых путях (Рис.1).

Рис.1. – Наличие спермы в половых путях свиноматок
 

Осеменения некапсулированными дозами Оссеменения капсулированными дозами
Осеменение некапсулированными (НК)
дозами 2 осеменения на свиноматку		 Осеменение капсулированными (К)
дозами 1 осеменение на свиноматку
Левая сторона Правая сторона Левая сторона Правая сторона
 
У свиноматок, подвергнутых двукратному осеменению НК-семенем, области шейки и тела матки содержали более высокое количество сперматозоидов. Но, что удивительно, в фаллопиевых трубах сперматозоидов было больше у свиноматок, осемененных капсулированным (К) семенем, несмотря на то, что осеменение животных этой группы было однократным.
 
Репродуктивные результаты, полученные после осеменения двумя разными типами спермадоз, различались, в зависимости от фермы (Табл.1).
 
Табл.1. Результаты осеменения, произведенного капсулированными спермадозами. (Sánchez-Sánchez и др., 2014.).
 
  Тип ИО К-во ИО/св-м. Группа n % супоросности Размер помета
Ферма 1 Традиционное ИО 2 НК 9 77.78 13.57 ± 2.64
2 К 10 90.00 14.89 ± 2.26
Внутриматочное ИО 2 НК 10 100.00 12.90 ± 1.91
2 К 7 85.71 13.17 ± 1.76
Ферма 2 Внутриматочное ИО 2 НК 64 85.94 11.63 ± 0.33
2 К 39 76.92 12.31 ± 0.47
Ферма 3 Традиционное ИО
P=0.056		 2 НК 34 94.12 14.15a ± 0.61
1 К 40 82.50 12.48b ± 0.60
Ферма 4 Внутриматочное ИО 2 НК 16 87.50 13.36 ± 0.80
1 К 16 81.25 12.38 ± 0.73
2 К 16 81.25 13.46 ± 0.83
 
На Ферме 1 применялось как традиционное, так и внутриматочное осеменение, по 2 осеменения на свиноматку. В результате использования капсулированных спермадоз, наблюдалось увеличение помета как при одном, так и при другом способе.

На Ферме 2 практиковалось только внутриматочное осеменение – по 2 спермадозы на свиноматку. В группе свиноматок, осеменявшихся капсулированным семенем, наблюдались увеличение помета и снижение процента супоросности.

На Ферме 3 осеменение проводилось традиционным способом, при этом, оно было двукратным если использовалось некапсулированное семя, и однократным – если капсулированное. Оба репродуктивных параметра после однократного осеменения капсулированным семенем оказались ниже.

На Ферме 4 проводили внутриматочное осеменение. Группа свиноматок, осеменявшихся капсулированным семенем, была поделена надвое, в зависимости от числа осеменений (одно или два), приходившихся на каждую свиноматку. У свиноматок, осемененных некапсулированным семенем, вырос процент супоросности, а у тех, что были подвергнуты однократному осеменению капсулированным семенем, уменьшился размер помета.

Выводы

Капсулирование семени предлагается к использованию в качестве нового метода, позволяющего улучшить протекание различных процессов, связанных с искусственным осеменением. Тесты, проведенные in vitro, не показали существенной разницы в параметрах семени при их оценке в период хранения образцов, охлажденных до 150С. Более того, разработанная система позволяет осуществлять медленное и постепенное высвобождение сперматозоидов из матрицы капсулы при температуре 380С.

Во время тестов in vivo, концентрация сперматозоидов в половых путях свиноматок, однократно осемененных капсулированным семенем, была более высокой, чем у свиноматок, двукратно осемененных некапсулированным семенем. В результате осеменений, проведенных на нескольких разных фермах, репродуктивные показатели тех свиноматок, что подверглись однократному осеменению капсулированным семенем, были хуже, чем тех, что осеменялись некапсулированными спермадозами двукратно.

Тем не менее, в группах, в которых выполнялось по два осеменения на эструс, на всех фермах размер помета всех свиноматок, осемененных капсулированным семенем, был больше.