Одна вспышка, два результата: как меры по предотвращению распространения инфекции ускорили восстановление хрячника.

Внутренняя система мониторинга РРСС, действующая в селекционно-генетическом центре, основана на следующих принципах:

• Еженедельная выборка: для достижения 95% уровня достоверности обнаружения при предполагаемой распространенности 2%. Образцы отбираются в течение трех дней в неделю.
• Тип образца: кровь из подкожной вены, поскольку она считается наиболее чувствительным образцом (см. статью «Выявление инфекции РРСС у хряков по типу образца»).
• Проведенные тесты: ПЦР на РРСС.

Введение: когда вирусу РРСС удаётся проникнуть внутрь

7 апреля 2024 года во время планового мониторинга в селекционно-генетическом центре два образца, полученные методом ПЦР, дали положительный результат на вирус репродуктивно-респираторного синдрома свиней (РРСС) у хряков в одном из двух зданий, что привело к немедленному срабатыванию протокола экстренной помощи:

• Закрытие селекционно-генетического центра по санитарным соображениям
• Отбор всех произведенных доз семени
• ПЦР-тестирование отобранных доз семени дало отрицательные результаты
• Внедрение плана действий в чрезвычайных ситуациях для обеспечения поставок доз клиентам

Наличие круглосуточно работающей лаборатории позволило быстро продвинуться в проведении испытаний. Результаты тестов, проведенных с 7 по 8 апреля на 100% хряков, подтвердили опасения:

• У 11 из 261 хряков в корпусе 2 (B2) был обнаружен вирус методом ПЦР.
• В отличие от этого, ни у одного из 267 животных в корпусе 1 (B1) вирус не был обнаружен.

Это открытие стало поворотным моментом: с этого момента мы начали гонку со временем, чтобы достичь следующего:

• Сдержать вспышку, предотвратив распространение вируса от корпуса B2 к корпусу B1
• Сохранить генетический материал
• Возобновить производство как можно скорее

В здании B1 используется глубокая система подстилки из соломы, а в здании B2 — сплошной решетчатый пол. Оба здания идентичны и расположены рядом друг с другом на расстоянии 10 метров. В обоих зданиях используется вентиляция с отрицательным давлением, с вытяжными вентиляционными отверстиями в торцах каждого здания и охлаждающими установками на боковых воздухозаборниках, но воздух не фильтруется.

До начала пандемии персонал, работающий в каждом здании, был разделен, но вход был одинаковым для всех: у входа и выхода из селекционно-генетического центра был душ, а также доступ в B1.

Сотрудники из B2 направлялись затем в свой корпус в «транзитной» одежде и обуви. У входа в B2 персонал проходил по датской схеме, чтобы принять «сухой» душ (сменить одежду и обувь) в раздевалке с четко разделенными чистыми и грязными зонами (рис. 1).

Меры по обеспечению безопасности

С самого первого дня приоритет был ясен: обеспечить отсутствие вируса РРСС в B1, чтобы производство могло возобновиться как можно скорее. Для достижения этой цели был предпринят ряд высокоточных мер:

Немедленная изоляция и внутреннее зонирование

• Связь между B1 и B2 была полностью прервана с момента появления первого положительного результата.
• Были созданы отдельные, независимые потоки для рабочих, задач, материалов и отходов. С 8 апреля доступ в B2 осуществлялся снаружи, и были введены в эксплуатацию душевые кабины для входа и выхода (Рисунок 2).
• В период с 9 по 12 апреля в B2 был произведен выбраковка всех кабанов с помощью масштабной логистической работы.

Структурная и экологическая биобезопасность после депопуляции B2

• Вентиляция была полностью отключена в B2 и сведена к минимуму в B1 (Рисунок 3).
• Было принято решение не начинать мойку B2 сразу же традиционным методом (водяной струей под высоким давлением), чтобы предотвратить образование аэрозолей, которые могли бы попасть в B1. Органические вещества удалялись с решетчатого пола вручную и сбрасывались в навозохранилища. В течение первой недели, пока корпус пустовал, его чистили вручную.
• На второй и третьей неделях после уничтожения популяции хряков B2 рабочие начали дезинфекцию без мытья и использования воды под высоким давлением. Цель заключалась в снижении вирусной нагрузки в окружающей среде до принятия решения о промывании водой под высоким давлением. На третьей неделе были взяты пробы окружающей среды (38 мазков) из станков, где содержались зараженные хряки, и проведены индивидуальные ПЦР-тесты на эти образцы, все из которых дали отрицательный результат.
• На четвертой и пятой неделях после удаления кабанов все поверхности в помещении B2 были обработаны промышленными паяльными лампами, а в конце пятой недели были взяты дополнительные пробы окружающей среды (25 мазков), все из которых дали отрицательный результат.

• На пятой неделе началась продажа семени из здания B1 после проведения двух официальных анализов крови у 100% имеющихся хряков и еженедельных анализов у ​​50% самцов, результаты которых по ПЦР и ИФА оказались отрицательными. До полного завершения мойки и дезинфекции здания B2 все хряки, собранные в здании B1, были протестированы методом ПЦР перед отправкой доз.
• На шестой неделе помещения были тщательно помыты с помощью воды под высоким давлением.
• На седьмой неделе, после мойки и дезинфекции помещения B2, начался простой.

Мойка: биологическая изоляция

• Трубы и навозные ванны в зоне B2 были герметизированы, чтобы предотвратить утечку аэрозолей в начале мойки и при необходимости вскрытия навозных ванн.
• К четырем вытяжным вентиляторам в помещении B2 была прикреплена пластиковая рама для перенаправления выходящего воздуха на пол, где были размещены большие поддоны с вирулицидным дезинфицирующим средством (фото 1 и 2).
• В помещении B1 все воздухозаборники (с системами охлаждения) на стене напротив B2 были герметизированы пластиком, чтобы предотвратить попадание воздуха и частиц (Фото 3). На противоположной стене, через которую воздух поступал в B1, были включены системы охлаждения, но с добавлением в циркулирующую воду дезинфицирующего средства, которое меняли каждые четыре дня.

Поэтапное возобновление работы

• 12 мая селекционно-гибридный центр (хряки из B1) получил официальное разрешение на продажу доз семени.
• B2 оставался неактивным до тех пор, пока не был помыт и продезинфицирован, после чего последовал период простоя, введение контрольных животных и пополнение поголовья хряков.

Week	BARN 1	BARN 2
0	7 апреля: 0 ПЦР-положительных результатов 8 апреля: 0 ПЦР-положительных результатовиз 267 хряков	7 апреля: 2 ПЦР-положительных результата 8 апреля: 11 ПЦР-положительных результатов из 261 хряка Закрытие селекционно-генетического центра, отбор и тестирование методом ПЦР всех произведенных доз (которые дали отрицательный результат), активация плана действий в чрезвычайных ситуациях для обеспечения доставки доз семениклиентам. 9-12 апреля: Депопуляция здания
1	100% хряков, официально протестированных методом ПЦР, + 50% хряков протестированных частным образом методами ПЦР и ИФА, с отрицательными результатами.	Ручное очищение органических веществ в навозные ванны.
2	100% хряков, официально протестированных методом ПЦР, + 50% хряков, протестированных частным образом методами ПЦР и ИФА, с отрицательными результатами.	Дезинфекция без мытья и без использования воды под высоким давлением во избежание образования аэрозолей.
3	50% хряков, прошедших частное тестирование методами ПЦР и ИФА, показали отрицательные результаты.	Сбор 38 проб окружающей среды и индивидуальное ПЦР-тестирование, все с отрицательными результатами. Цель: взять пробы из станков, в которых содержались кабаны с положительным результатом.
4	Частные ПЦР- и ИФА-тесты были проведены у 50% кабанов, результаты отрицательные. 12 мая: Продажа доз из сарая № 1 была официально разрешена.	Все поверхности обработаны паяльной лампой. Было взято 25 проб окружающей среды, каждая из которых была протестирована методом ПЦР, результаты отрицательные.
5	Перед выпуском доз проводилось частное тестирование 100% образцов от кабанов, отобранных для ПЦР- и ИФА-тестирования.
6	Перед выпуском доз проводилось частное тестирование 100% образцов от кабанов, отобранных для ПЦР- и ИФА-тестирования.	Начало процесса глубокой мойки с помощью воды под высоким давлением.
7		Начало периода простоя
8
9		Программа "Наблюдение": перевод 12 хряков для выбраковки из загона B1 в загон B2. Ротация по 100% загонов.
10		Отрицательные результаты ПЦР и ИФА у контрольных животных.
11		Здание снова заполнено животными.

* все анализы крови.

Мониторинг еженедельного размера выборки с уровнем достоверности 95% и распространенностью 2%, распределенный на 3 дня отбора проб. Тип образца: кровь из подкожной вены, тест: ПЦР.

Расследование: отслеживание невидимого пути вируса

Было проведено детальное эпидемиологическое расследование, сфокусированное на днях, предшествовавших обнаружению вируса. Были проанализированы входы персонала, технические визиты, транспортировка животных, вывоз туш и внутренние перемещения, а также погодные условия.

В качестве потенциальных точек входа было выявлено несколько элементов:

• Использование нового трактора (привезенного 16 марта) для транспортировки туш из обоих зданий к месту сбора, расположенному в 500 метрах от фермы, может привести к ошибкам при перемещении между «грязной» и «серой» зонами фермы и доступе к контейнеру для туш.
• 19 и 26 марта проводились ремонтные работы систем охлаждения, в ходе которых рабочие неоднократно использовали входы и выходы в критически важных зонах.
• В дни, предшествовавшие обнаружению инфекции, выпали осадки и понизилась температура, что способствовало сохранению вируса в окружающей среде, если он попал в близость к ферме.

Несмотря на все наши усилия, нам не удалось установить единый источник. Генетическая последовательность вируса, выделенного в селекционно-гибридном центре, была внесена в GenBank и совпала со штаммами с фермы, расположенной в деревне в 38 км от него, в районе с высокой плотностью свиноводства.

Уроки, извлеченные из опыта: превентивные меры на будущее

Вспышка эпидемии выявила операционные недостатки, что привело к разработке комплексного плана непрерывного совершенствования:

• Изменения в методе утилизации туш: от традиционной системы сбора, осуществляемой сторонней компанией, отказались в пользу процесса гидролиза.
• Новые камеры видеонаблюдения: изображения передаются в режиме реального времени на мобильные устройства группы по обеспечению безопасности здоровья, что улучшает отслеживание движения транспорта за пределами зданий и на внешних въездах.
• Перепроектирование точек доступа: С начала пандемии два здания оставались полностью разделенными с точки зрения доступа для рабочих, материалов и т. д.
• Ветеринар на площадке: Ветеринарный врач головной компании теперь находится в селекционно-гибридном центре, что улучшает повседневный контроль.

Вывод: сдерживание распространения вируса стало возможным благодаря наличию плана

Пример этого центра демонстрирует, что даже при столкновении с такой скрытой и потенциально разрушительной инфекцией, как РРСС, сочетание быстрого реагирования, точных мер и адаптивной биобезопасности может иметь решающее значение. Осведомленность персонала на протяжении всего процесса депопуляции, уборки, дезинфекции, пополнения поголовья и повторного открытия центра была крайне важна.

Благодаря сохранению здорового состояния поголовья в здании B1, селекционно-гибридный центр значительно сократил период его непродуктивности и избежал нарушения поступления генетического материала.

В условиях высокой плотности поголовья свиней, постоянного перемещения животных и высокой контагиозности вирусов фермы должны быть готовы к неожиданностям. Наличие практичного плана действий в чрезвычайных ситуациях – это не просто желательный, а жизненно важный элемент любого хозяйства.