Значение патологии в диагностике свиней

Установление точного диагноза заболевания является обязательным условием для решения конкретной клинической проблемы у любого вида животных. Во всех случаях клиническое обследование пациента/пациентов является краеугольным камнем для дальнейшего развития диагностического подхода.

Внезапные вспышки заболеваний представляют собой серьёзную проблему как для владельцев ферм, так и для ветеринаров, которым необходимо выявить и устранить причины проблемы, чтобы восстановить нормальное положение дел. В этих обстоятельствах ветеринар, специализирующийся на свиноводстве, становится исследователем, поскольку ему/ей приходится оценивать множество факторов, которые могут способствовать возникновению заболевания, в сложной ситуации, включающей аспекты, связанные с окружающей средой, питанием, биобезопасностью, эпидемиологией, наличием множества патогенов и взаимодействием человека и свиньи.

Заболевания, охватывающие всю популяцию, как правило, имеют инфекционную или алиментарную природу (интоксикация или дефицит питательных веществ). Первый диагностический подход всегда включает тщательное клиническое и эпидемиологическое обследование, проводимое ветеринаром. Если клинический исход предполагает гибель или тяжёлое поражение свиней, вскрытие некоторых из них (считающихся репрезентативными для данного заболевания) должно дать представление о причине или, по крайней мере, исключить определённые этиологические факторы.

Вскрытие должно проводиться упорядоченно, с систематическим подходом и в полном объеме.

Наличие поражений в большинстве случаев не может указывать на конкретные причины, но позволяет сориентироваться в них или сузить список дифференциально-диагностических исследований.

Например, картины макроскопической пневмонии предлагают набор этиологических возможностей, хотя в ряде случаев необходимо выйти за рамки и использовать дополнительные (лабораторные) тесты.

Лабораторные анализы: не все то золото, что блестит!

Различные аналитические подходы помогают идентифицировать потенциальные патогены (вирусы, бактерии, паразиты, грибы) или токсины, участвующие в клинической проблеме. Наиболее часто используемые в настоящее время методы включают молекулярно-биологические тесты, такие как полимеразная цепная реакция (ПЦР) и её варианты (качественный, количественный, для ДНК или РНК). Значительным преимуществом этого метода является его чувствительность (способность обнаруживать минимальные количества генома патогена или гена, кодирующего токсин), но это же является и его недостатком, поскольку одного лишь обнаружения патогена или токсина в эндемичных условиях недостаточно для установления однозначного этиологического диагноза.

Другие лабораторные методы, такие как выделение бактерий (включая антибиотикограмму), чрезвычайно полезны, поскольку позволяют установить этиологию заболевания и предположить успешное лечение. Методы обнаружения антител, с другой стороны, являются отличными инструментами мониторинга, но обладают ограниченными диагностическими возможностями, поскольку наличие таких антител зависит от статуса вакцинации и/или инфекции, а также от материнского иммунитета.

Гистопатология: ценный инструмент, обеспечивающий последовательность диагностического исследования

Помимо лабораторных исследований, специально направленных на определение патогенов или токсинов, гистопатология может предоставить надежную основу для установления истинной причинно-следственной связи клинической проблемы. Другими словами, обнаружение конкретного патогена или токсина должно согласовываться с клиническими, эпидемиологическими данными и данными макроскопического исследования поражений, и гистопатологический анализ может однозначно подтвердить такое соответствие.

Хорошим примером практической пользы микроскопической оценки может служить обнаружение вируса методом ПЦР при респираторном заболевании, при котором типичные гистологические поражения, вызываемые этим возбудителем, отсутствуют в лёгких (при условии, что свинья или группа свиней являются репрезентативными для наблюдаемого заболевания). Такой сценарий должен побудить к повторному анализу предполагаемого диагноза и дальнейшему исследованию.

Ветеринарный врач, специализирующийся на свиноводстве, должен рассматривать гистопатологию как очень ценный инструмент, по крайней мере столь же важный, как ПЦР, методы выделения бактерий или обнаружения антител. Микроскопические исследования позволяют поставить морфологический диагноз, который подтверждает или опровергает данные, полученные с помощью клинических, эпидемиологических или других лабораторных исследований, тем самым способствуя установлению вероятного этиопатогенеза клинической проблемы. Эта общая информация важна, поскольку служит своего рода предиктором эффективности мер контроля и профилактики, применяемых для борьбы с заболеванием.

Сбор образцов для гистопатологии (и других лабораторных исследований) относительно прост, но требует определенных знаний о патогенезе заболеваний, а также некоторых технических навыков:

• Образцы следует брать со свежих туш (в идеале, от недавно павших или умерщвлённых свиней).
• Ткани следует немедленно фиксировать погружением в 10% буферный формалин.
• Не рекомендуется отправлять охлаждённые образцы на гистопатологический анализ, поскольку может наблюдаться определённая степень аутолиза.
• Кроме того, замороженные образцы содержат множество артефактов, что затрудняет микроскопическую интерпретацию.
• Размер образца ткани должен быть относительно небольшим (или, по крайней мере, тонким для лучшей фиксации).
• Образцы должны включать как сильно поражённые участки, так и фрагменты предположительно нормальной ткани (рис. 1).
• В случае образцов кишечника важно продольно вскрыть кишечник, чтобы обеспечить прямой контакт формалина со слизистой оболочкой кишечника.
• Напротив, такой крупный орган, как мозг, предпочтительнее фиксировать целиком или его половину; Цель этой процедуры — обеспечить сохранение топографии мозга во время фиксации, чтобы затем патолог мог выбрать нужную часть и попытаться установить наиболее вероятный диагноз.

Важно отметить, что помимо простого гистопатологического анализа (основанного на окраске гематоксилином и эозином, рисунок 2), другие дополнительные патологические тесты могут помочь в поиске этиологических агентов.

Наиболее часто используемыми являются иммуногистохимия (рис. 3) и гибридизация in situ (рис. 4), которые позволяют обнаруживать патогены в месте воздействия, подтверждая их роль в клиническом и патологическом контексте. Кроме того, существуют и другие методы (гистохимическое окрашивание), которые не позволяют установить конкретную этиологию, но позволяют судить о причине заболевания (например, окраска по Грокко для выявления грибов или окраска по Граму для выявления грамположительных или грамположительных бактерий).

Подводя итог, можно сказать, что ветеринарный врач, специализирующийся на свиноводстве, помимо собственных клинических, эпидемиологических и макроскопических исследований поражений, располагает широким спектром аналитических возможностей, в которых гистопатология может играть важную роль в изучении позвоночника. Эффективное взаимодействие между врачами-клиницистами и патологами расширяет диагностические возможности, способствуя более раннему и эффективному решению клинических проблем.