Лабораторная диагностика: Парвовирус

Доступные анализы:

Иммунофлуоресцентное антитело (IFA)

• Обнаруживает наличие вирусного антигена
• Типы образцов: ткани (абортированные или мумифицированные плоды)
• Преимущества:
  • Обнаруживает вирус у абортированных или мумифицированных плодов (надежное доказательство причинно-следственной связи).
  • Любой положительный результат считается значимым
• Недостатки:
  • Некоторые мумифицированные ткани слишком разложились, чтобы обнаружить вирус.
  • Требуется значительно большая вирусная нагрузка, чем при ПЦР.
  • Часто заражение вирусом происходило за несколько недель до аборта или рождения мумифицированного плода.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

• Обнаруживает наличие определенной последовательности вирусной нуклеиновой кислоты (ДНК).
• Типы образцов: ткани
• Преимущества:
  • Высокая чувствительность.
  • Умеренная стоимость
    • Часто можно объединить образцы тканей для снижения затрат и минимизации потери чувствительности (особенно в отношении клинической значимости).
• Недостатки:
  • Для достижения наилучших результатов требуются образцы тканей абортированных или мумифицированных плодов.
  • Некоторые мумифицированные ткани слишком разложились, чтобы обнаружить вирус.

Иммуноферментный анализ (ИФА)

• Обнаруживает наличие антител
• Типы проб: сыворотка
• Преимущества:
  • Животные остаются положительными в течение нескольких месяцев или лет
  • Возможность тестирования большого количества животные
  • Вакцинированные животные производят значительно более низкие уровни антител по сравнению с полевым заражением.
  • Для того, чтобы стать серопозитивным, требуется всего 6–10 дней.
• Недостатки:
  • Серораспространенность высока, поскольку возбудитель распространен
  • Некоторые методы ELISA позволяют отличить вакцину от воздействия вируса дикого типа.
  • • Инактивированные вакцины стимулируют образование антител только к структурным белкам (VP1/VP2).
    • Дифференциальный ИФА нацелен на неструктурные белки (НС).

Ингибирование гемагглютинации (HI)

• Обнаруживает наличие антител
• Типы проб: сыворотка
• Преимущества:
  • Животные остаются положительными в течение нескольких месяцев или лет.
  • Более высокая чувствительность, чем у ИФА (может обнаружить более низкую концентрацию антител)
  • Вакцинированные животные производят значительно более низкие уровни антител по сравнению с полевым заражением.
  • • Вакцина обычно ≤ 1:500
    • Полевая инфекция ≥ 1:2000
  • Животные дают серопозитивный результат уже через 6 дней после заражения.
• Недостатки:
  • Невозможно использовать большое количество образцов.
  • Надежность во многом зависит от навыков технического специалиста.
  • Реактивность зависит от температуры инкубации.

Интерпретация результата:

IFA

• Положительный: вирус присутствует у плода.
• Отрицательный: отрицательный или заражение произошло на ранних сроках супоросности и слишком поздно, или ткани слишком разложились для обнаружения вируса.

PCR:

• Положительный: вирус присутствует у плода.
• Отрицательный: отрицательный или заражение произошло на ранних сроках супоросности и слишком поздно, или ткани слишком разложились для обнаружения вируса.

ELISA (differential ELISA)

• Позитивные:
• Низкие значения после воздействия вакцины (>6 дней).
• Высокие значения: недавний контакт с вирусом дикого типа.
• Отрицательный: отрицательный результат или инфекция дикого типа, которую слишком рано обнаружить.

HI

• Позитивные:
• Низкие значения после воздействия вакцины (>6 дней).
• Высокие значения: недавний контакт с вирусом дикого типа.
• Отрицательный: отрицательный результат или инфекция дикого типа, которую слишком рано обнаружить.

Сценарий:

Sow herd with infertility and mummified fetuses

Отсеять стадо с бесплодием и мумифицированными плодами

• Соберите 4–8 плодов (целевые мумифицированные плоды) и объедините образцы для ПЦР-тестирования.
• Абортированные свиноматки/свинки: соберите сыворотку у больных
  • Если титры HI ≥ 1:2000 – подтвердите недавнюю вирусную инфекцию.
  • В противном случае повторите анализ через 2–4 недели и сравните титры с течением времени, чтобы выявить > двукратное увеличение.

Отсеять поголовье с бесплодием и НЕТ мумифицированных плодов:

• Соберите сыворотку от больных и здоровых свиноматок сегодня и повторите тестирование тех же животных через 2–4 недели.
• • Если титры HI ≥ 1:2000 – подтвердите недавнюю вирусную инфекцию.
  • В противном случае сравните титры с течением времени, ища > два раза.
• Оценить паритетное распределение пострадавших животных.
• • Парвовирусная инфекция чаще встречается у животных 1-го или 2-го помёта, поскольку животные старшего помёта с большей вероятностью уже имеют защиту.