Лабораторная диагностика: Salmonella

Доступные исследования:

Бактериальная культура:

• Выделение живого организма из ткани c поражением
• Типы образцов: фекалии, кровь, селезенка, легкие, почки, лимфатические узлы
• Преимущества:
  • В острой фазе бактерии легко размножаются в течение 1-2 дней
  • Легко провести анализ в любой лаборатории (включая дома).
  • Относительно низкие затраты.
• Недостатки:
  • Для анализа крови возможно будет необходимо элективное обогащение
  • У свиней, пролеченных антибиотиками, может предотвращаться размножение бактерий
  • Фекалии ненадежны для диагностики системных случаев
  • Выделение неравномерное; со временем происходит выделение становится периодическим

Чувствительность к антибиотикам

• Тесты in vitro на способность живого организма размножаться при определенных концентрациях различных противомикробных препаратов.
• Типы образцов: фекалии, кровь, селезенка, легкие, почки, лимфатические узлы
• Преимущества:
  • Идентификация чувствительности или резистентности определенных изолятов к распространенным антибактериальным препаратам
  • Выявление тенденций устойчивости к противомикробным препаратам.
• Недостатки:
  • Требуется бактериальный изолят.
  • Тесты in vitro могут слегка отличаться от результатов in vivo.
  • Определенные противомикробные препараты могут не тестироваться или требуют отдельного специального тестирования.
  • Средние затраты.

Бактериальное серотипирование

• Серогруппирование происходит на основе идентификации различных антигенов О и Н в изоляте сальмонеллы.
• Преимущества:
  • Серотипирование может осуществляться с:
    • Использование различных антисывороток
    • Метода полимеразной цепной реакции (ПЦР), который обнаруживает наличие определенной последовательности нуклеиновых кислот (ДНК), связанных со специфическими антигенами.
    • Использования микрочипов для обнаружения определенных последовательностей ДНК для определенных антигенов
  • Помогает определить патогенность бактериального изолята на основе серотипирования, связанного со специфическими антигенами.
  Недостатки:
  • Требуется бактериальный изолят.
  • Средние затраты.

Твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA)

• Выявляет наличие антител
• Типы образцов: сыворотка или ротовые жидкости
• Преимущества:
  • Животные остаются положительными в течение нескольких недель
  • Можно использовать при хронических случаях
  • Можно использовать парные образцы, если заражение произошло недавно
• Недостатки:
  • Обнаруженные специфические антитела и время обнаружения могут незначительно отличаться в зависимости от доступных коммерческих наборов.
  • Чтобы животные стали серопозитивными Может потребоваться от 3-4 дней до 3+ недель; разное время до сероконверсии в зависимости от серотипа и дозы воздействия.
  • Не могут выявлять различия между живыми вакцинными бактериями и «дикой» инфекцией.
  • Отсутствует стойкий серологический ответ на инфекцию; разные серотипы и разные дозы инфекции влияют на иммунный ответ.
  • Материнские антитела могут усложнить интерпретацию результатов на ранних стадиях доращивания.

Интерпретация результатов:

Бактериальная культура

• Количество:
  • От умеренного до высокого: сильное подозрение на возбудителя заболевания
  • Низкий: сомнительное значение (может быть контаминантный или непатогенный серотип)
  • Отсутствие роста: возможно выделения (периодическое выделение) не происходит из-за того, что животное, ранее лечили антибиотиками, или присутствует несущественное влияние

Бактериальное серотипирование

• Чувствительные: возможен большой выбор для лечения, если противомикробный препарат достигает таргет-мишени.
• Устойчивые: выбирайте различные препараты
• МПК: если МПК установлены, убедитесь, что выбранный препарат достигает таргет-органа.

Серотипирование:

• Серотипирование позволяет группировать по серотипам, что очень важно для определения значимости изолята.

Таблица с наиболее распространенными серотипами сальмонелл и их соответствующими серогруппами.

Группа B	Группа C1	Группа D
Derby	Choleraesuis	Dublin
Heidelberg	Infantis	Enteritidis
Typhimurium	Newport

ELISA

• Положительный:
  • Предыдущий контакт с вакциной или бактериями дикого типа
  • Можно использовать парные образцы сыворотки с интервалом в две-три недели для подтверждения недавней инфекции.
• Отрицательный:
  • Отрицательный результат на вакцину или бактерию дикого типа.
  • Прошло слишком мало времени для определения инфекции
  • Малая доза при контакте
  • Инфицирование мягкими серотипами
  • Использование антибиотиков может подавлять рост бактерий, что приводит к снижению дозы выделения и ослаблению иммунного ответа.

Сценарии:

Свиньи на доращивании с диареей (острая или хроническая форма)

• Соберите образцы фекалий от 10 или более свиней с диареей, которых не лечили, объедините их в группы по 5 и отправьте на бактериальный посев и определение чувствительности.
• Серотипируйте все образцы, положительные на Salmonella.

Свиньи на доращивании с системным заболеванием (с или без диареи)

• Вскрытие 1-3 недавно умерших или умерщвленных свиней с диареей. Соберите ткани для бактериального посева (селезенка, печень, желудочно-печеночные сосуды).

Определение времени контакта:

• Соберите образцы от 10-15 свиней в возрасте 8, 12, 16 и 20 недель.
• • Два подхода к отбору:
    • Поперечный срез – собрать образцы от разных возрастных групп одновременно (для более быстрого получения результатов).
    • Продольный – сбор от одних и тех же свиней в течение времени (результаты более точны для серологической интерпретации).
• Образцы сыворотки тестируются индивидуально с помощью ELISA.
• Образцы фекалий объединяют в группы по 5 в зависимости от возрастной группы и отправляют на бактериальный посев и определение чувствительности.
• Серотипируйте все образцы, положительные на Salmonella.