Диагностика инфекции, вызванной App

АПП может вызвать три типа инфекции

1. острая (уровень смертности высокий или выше среднего)
2. хроническая (низкий уровень смертности, мало специфических клинических признаков, снижение привесов и/или видны поражения при забое)
3. субклиническая (клинические симптомы и поражения при забое отсутствуют)

Обычно диагностика острой формы не является сложной

• У зараженных животных обычно поражены легкие, что достаточно характерно для животных, зараженных АПП. От легких необходимо отобрать образцы и отправить в лабораторию.
• Любая диагностическая лаборатория с опытом выделения бактерий у свиней сможет корректно выделить и идентифицировать АПП. Тем не менее, в некоторых европейских странах (например, Испания, Бельгия, Франция) существуют нетипичные штаммы АПП (называемые изолятами биотипа II), поэтому для некоторых лабораторий это будет сложно сделать.
• Идентификация серотипа может быть важна: в зараженном поголовье эта информация покажет степень риска. Серотипы с высокой вирулентностью являются первичными патогенами; серотипы с вирулентностью выше среднего обычно приводят к смертности в поголовье с высоким статусом здоровья или при наличии коинфекции и/или других предрасполагающих факторов. Знание серотипа также полезно для идентификации коммерческого бактерина, который можно использовать в данном поголовье. Наконец, существует необходимость распределения вирулентных серотипов по оценке степени риска для субклинически зараженного поголовья (см. ниже). Серотипизация проводится с помощью ПЦР анализа и доступна для любой диагностической лаборатории.

Диагностика хронической формы более сложная

• Поражения, характерные при плеврите и наблюдаемые при забое могут быть свойственными болезни, но не обязательно патогномическими.
• Определить АПП при подобных поражениях, особенно когда они достаточно старые, очень сложно и зачастую получают ложноотрицательные результаты.
• Очень часто также присутствуют коинфекции (например, Mycoplasma hyopneumoniae), что затрудняет постановку диагноза.
• Если присутствуют некоторые клинические симптомы, можно провести серопрофилирование, используя ИФА-анализ на основе токсина ApxIV (см. ниже), сначала при наличии клинических симптомов, затем через 21-28 дней для подтверждения явной сероконверсии.
• При отсутствии клинических симптомов, повреждения, обнаруженные при забое вместе с положительными результатами ИФА-анализа на основе токсина ApxIV могут являться индикатором инфекции АПП: необходимо протестировать 25-30 образцов плазмы. При положительных результатах, для подтверждения, необходимо отобрать межсекционные образцы плазмы: 10 образцов раз в неделю в возрасте 10-20 недель. Поголовье, которое может быть заражено АПП это то, в котором присутствует явное увеличение положительных серологических результатов в указанный момент времени.
• Отсутствие клинических симптомов и повреждений при забое, с наличием позитивных результатов ИФА теста на основе липополисахарина (LPS) (см. ниже) для вирулентного серотипа (в указанной стране) является индикатором инфекции АПП. При забое можно отобрать образцы плазмы (25-30 образцов плазмы).

Диагностику субклинически зараженного поголовья нужно проводить через серологию

В связи с отсутствием клинических симптомов и повреждений, диагностировать субклинические инфекции непросто. Обычно животные не поражены (конверсия корма, прирост и т.д.). Это становится проблемой для племенного поголовья: субклинически зараженные животные могут быть «животными-носителями», которые могут передать АПП из миндалин другим животным. Вирулентный штамм может не вызвать болезнь в одном поголовье, но может вызвать высокий уровень смертности в другом, более подверженном поголовье. Даже в одном поголовье, смена системы работы с поголовьем, условия окружающей среды или попадание коинфекций может перевести инфекцию из субклинической формы вирулентного штамма во вспышку плевропневмонии. Серология – важный инструмент для диагностики субклинически зараженного поголовья. Возникают два вопроса:

1. Какой тест следует использовать?

Доступны два коммерческих типа ИФА тестов: на основе Apxiv (определяет все штаммы АПП без распознавания серотипа) и на основе LPS, определяющий специфический серотип (см Таблицу 1).

Таблица 1: Использование коммерчески доступных ИФА тестов для определения антител против АПП

	ИФА на основе Apxiv	На основе LPS, определяющий специфический серотип
Товарное поголовье	Бесполезно (большинство поголовья дают позитивные результаты)	Полезно только если тестируются вирулентные серотипы
Поголовья с высоким статусом здоровья (подтвержденные как свободные от АПП)	Полезно	Бесполезно (тестирование всех отдельных серотипов слишком дорого)
Подверженность (после экспериментальных заражений)	+++	++++
Специфичность (экспериментальные заражения с другими бактериальными видами)	++++	+++
Постоянное использование для оценки производителей племенных животных в нескольких странах	Нет	Да

Тест на основе Apxiv будет положительным в любом зараженном АПП поголовье (вирулентные или невирулентные штаммы). Более 70% товарных поголовьев в большинстве стран будут давать положительные результаты на этот тест. Тесты на основе LPS должны ориентироваться на самые значимые и наиболее вирулентные серотипы, что покажет вам степень риска в данном поголовье. Существует необходимость знать распределение вирулентных серотипов в данной стране: выделенные от больных животных штаммы должны быть серотипизированы для получения этой информации.

2.Сколько образцов и от каких категорий животных должно быть отобрано для диагностики инфицированного поголовья? Как часто необходимо тестировать поголовье, чтобы классифицировать его как «неинфицированное поголовье»?

Мы рекомендуем отбирать около 30 образцов плазмы в конце откорма; если опорос происходит по партиям, то необходимо тестировать различные партии, чтобы избежать ложноотрицательных результатов. Нет универсального правила для классификации поголовья как «свободного», но рекомендуется повторять тесты, по крайней мере, 2-3 раза в год.

Наконец, для племенного поголовья неоднозначные серологические результаты могут усложнить диагностику. В подобных случаях определение АПП из миндалин можно проводить посредством ПЦР серо-положительных животных. Если поголовье положительное по различным вирулентным и невирулентным серотипам, необходимо использовать ПЦР, определяющий серотип (для вирулентного серотипа, определенного посредством серологии). Для поголовья, считающегося свободным от АПП, можно использовать ПЦР на основе АПП (для всех серотипов). Эти тесты должны проводиться в лабораториях с опытом работы; однако иногда наблюдаются ложноотрицательные или ложноположительные результаты.