Quais as fracções de ejaculado que devem ser incluídas ao preparar as doses de inseminação artificial?

Desde o desenvolvimento moderno da inseminação artificial suína (IA), uma das questões mais levantadas tem sido que fracção ou fracções do ejaculado devem ser incluídas nas doses de sémen. Em geral, a fracção rica do ejaculado tem sido a parte incluída nas doses, devido à crença de que a parte final do ejaculado (fracção pós-espermática caracterizada pelo alto volume de plasma seminal e baixa concentração espermática) teve um efeito deletério na qualidade do esperma durante a manutenção da dose. É verdade que alguns estudos confirmaram esse facto, mas avaliando o efeito de cada fracção do ejaculado separadamente (revisto por Höfner et al. 2020a), mas não avaliando o possível efeito sinérgico das diferentes fracções como um todo na conservação de doses de sémen, fertilidade e descendência. Para corroborar este facto, foi realizado um estudo preparando 3 tipos diferentes de doses seminais segundo as fracções incluídas durante a recolha do ejaculado: 1) Dose seminal F1: inclui a fracção rica do ejaculado; 2) F2: F1 mais a fracção de transição entre a fracção rica e a fracção pobre; 3) F3: F2 mais a fracção pobre. Como é habitual em cada colheita, a fracção inicial de pré-esperma é descartada, bem como a tapioca (fracção filtrada). Uma vez recolhidos os ejaculados, as doses seminais foram ajustadas para 2000x10⁶ espermatozóides/60 ml com diluente comercial e armazenadas a 16ºC durante 3 dias. Após este tempo, a qualidade do sémen foi analisada e as IAs foram realizadas com as mesmas doses em porcas multipares (3-5 partos). O desenho experimental do estudo está resumido na figura 1.

Os resultados da análise seminal mostraram que os 3 tipos de doses mantiveram qualidade espermática similar, sem que as fracções de ejaculado incluídas afectassem nenhum parâmetro (vídeo 1). Embora seja certo que a qualidade espermática nem sempre é sinal de fertilidade adequada, os resultados das IAs demonstraram que os dados de fertilidade e prolificidade também foram semelhantes entre os grupos experimentais, assim como os dados de crescimento e saúde (avaliados através de análises hematológicos e bioquímicos) nos leitões.

Vídeo 1. Motilidade dos espermatozóides nos diferentes tipos de doses seminais (F1, F2, F3) após 3 dias de conservação a 16ºC.

Os resultados do estudo indicam que a inclusão de todas as fracções do ejaculado na preparação das doses seminais não implica um efeito adverso sobre a conservação espermática nem sobre os rendimentos produtivos após a IA. Isto conduz a uma série vantagens para ter em conta:

• Redução do diluente nas doses seminais: a fracção pobre do ejaculado é caracterizada por um elevado volume de plasma seminal. A inclusão desta fracção em doses seminais leva a uma redução no diluente a adicionar, uma vez que o volume é fornecido pela fracção pobre. Além de reduzir o custo do diluente por dose de sémen, a utilização de antibióticos em cada dose está também a ser reduzida.
  Maior eficiência dos machos: a utilização apenas das primeiras fracções do ejaculado nas doses seminais resulta no descarte de parte do material genético na última fracção. O nosso estudo quantificou o número de doses seminais (2000x10⁶/60 ml) como 32,3 usando F3, enquanto 26,0 foram preparados com F1.
• Maior eficiência dos operadores: recolher todas as fracções de ejaculado significa que a recolha semi-automática de sémen pode ser implementada nos centros de IA. Isto resulta numa maior eficiência no trabalho dos operadores, uma vez que estes podem realizar várias colheitas em simultâneo.
• Produto final mais homogéneo e económico: da utilização de doses com F3 deriva um aumento da percentagem irmãos (por cada 100 inseminações) em 2,47% relativamente ao uso das doses F1. Esta medida contribui para um aumento da homogeneidade do produto e portanto numa melhoria da produção de precisão.
• Vantagem económica:ao realizar um estudo económico exaustivo incluindo custos fixos, custos variáveis, consumíveis, embalagem, diluente, água de osmose e PCR, foi estimada uma redução no custo de produção por dose de aproximadamente 20% de F3 em comparação com F1. Esta redução de custos tem o mesmo impacto no custo de produção por leitão nascido vivo, calculado em 0,12 euros por leitão, de acordo com os dados do estudo. Esta redução seria ainda mais notável em genética menos prolífica.

No entanto, embora os resultados obtidos indiquem claramente a possibilidade de utilizar F3 em doses seminais, devemos também ter em conta algumas limitações possíveis:

• Machos e linha genética: foram utilizados um total de 6 machos de fertilidade testada da mesma linha genética cujo rendimento em conservação e fertilidade / prolificidade foi semelhante entre eles. No entanto, outros estudos evidenciaram diferenças na composição do plasma seminal entre machos e entre linhas genéticas (Mills e cols. 2020; Höfner e cols. 2020b; Xu e cols. 2021), pelo que o uso de outros machos pode conduzir a eficiência diferente na conservação espermática e ao rendimento reprodutivo do obtido no presente estudo.
• Tempo de conservação: no nosso caso, comparámos o rendimento dos diferentes tipos de doses de sémen aos 3 dias de armazenamento, mas em certas situações é necessário prolongar este prazo de validade, pelo que é necessário realizar estudos complementares, aumentando este período.
• Tipo de diluente: temos utilizado um diluente de longa duração, mas no mercado existem múltiplos diluentes com diferentes características e composição, pelo que seria adequado conduzir um estudo semelhante comparando os diluentes comerciais mais utilizados.

Em resumo, demonstrámos o uso potencial do ejaculado total na produção de suínos com as vantagens e desvantagens descritas acima. No entanto, antes de implementar esta prática nos centros de inseminação artificial, é aconselhável realizar testes iniciais de conservação de doses seminais com machos seleccionados, como foi realizado neste estudo, a fim de verificar a qualidade do esperma e optimizar o rendimento dos machos.

Projecto financiado pelo Ministério espanhol de Ciência e Inovação (PID2019-106380RBI00 MCIN/AEI/10.13039/501100011033