Diagnóstico laboratorial: Glaesserella (Haemophilus) parasuis (Doença de Glässer )

Testes disponíveis:

Cultura bacteriana

• Isolamento de organismos vivos.
• Tipos de amostra: exsudado fibrinoso ou parênquima de pulmão ou órgão afectado.
• Prós:
  • Disponível na maioria dos laboratórios.
  • A taxa de êxito pode aumentar significativamente usando zaragatoas com meios de transporte Amies e refrigerando as amostras.
  • Custo relativamente baixo.
  • Cultivar estirpes específicas da exploraçáo é útil para:
    • Serotipado.
    • Determinar a sensibilidade aos antimicrobianos.
    • Isolar para a produção de vacinas.
• Contras:
  • Difícil cultivar bactérias devido à sua natureza exigente e sobrevivência limitada a temperatura ambiente.
  • Nem todas as estirpes de G. parasuis são patogénicas.
  • Se os porcos foram previamente tratados com antibióticos, isso pode limitar o crescimento bacteriano.

Susceptibilidade antimicrobiana (antibiograma)

• Test in vitro: capacidade de um organismo vivo para crescer em concentrações específicas de diferentes antimicrobianos.
• Tipos de amostra: exsudado fibrinoso ou parênquima de pulmão ou órgão afectado.
• Prós:
  • Identificação de susceptibilidade ou resistência de estirpes específicas a antimicrobianos comuns.
  • Identificação de tendências de resistência aos antimicrobianos.
• Contras:
  • Requer um isolado bacteriano.
  • Os testes in vitro podem diferir ligeiramente dos resultados in vivo.
  • Alguns antimicrobianos específicos podem não estar listados ou podem exigir testes especiais separados.
  • Custo moderado.

Reacção em cadeia da polimerase (PCR)

• Detecta a presença de sequências específicas de ácido nucleico bacteriano (DNA).
• Tipos de amostra: exsudato fibrinoso ou parênquima pulmonar ou órgão afectado.
• Prós:
  • Sensibilidade muito alta (pode detectar pequenas quantidades de bactérias).
  • Pode detectar bactérias mortas o que contorna a dificuldade de cultivo devido à sua natureza exigente e sobrevivência limitada à temperatura ambiente.
  • Detecção precoce: casos agudos devem ser positivos.
  • Custo moderado.
• Contras:
  • Nem sempre comprova a patogenicidade ou virulência do isolado.
  • Organismo que muitas vezes faz parte de infecções secundárias ou co-infecções.
  • Requer primers adequados.

Serotipado – PCR

• Uma técnica de reacção em cadeia da polimerase (PCR) que detecta a presença de sequências específicas de ácido nucleico (DNA) associadas a genes de virulência.
• Prós:
  • Não requer armazenamento de anti-soros como ocorre com serotipagem sorológica.
  • Facilita a selecção adequada da vacina ou produção autógena (dependendo do sorotipo).
• Contras:
  • Requer um isolado bacteriano.
  • Muitos isolados não podem ser tipificados.
  • Preço moderado, mas normalmente apenas um isolado é testado.

Interpretação de resultados:

Cultura bacteriana:

• Quantidade:
  • Alta: altamente sugestivo de que se está a dever à doença.
  • Moderado: altamente sugestivo de que se está a dever à doença.
  • Baixo: interpretação variável.
  • Sem crescimento: animal possivelmente tratado previamente com antibióticos, infecção crónica, manipulação inadequada da amostra ou a bactéria não está a contribuir para a doença.

Susceptibilidade antimicrobiana (antibiograma):

• Susceptível: possível boa escolha para tratamento se o antimicrobiano pode atingir o tecido alvo.
• Resistente: um antimicrobiano diferente deve ser seleccionado.
  CIM: caso seja realizada a CIM (concentração inibitória mínima), deve-se garantir que o antimicrobiano selecionado atinja o valor de CIM indicado no órgão alvo.

PCR:

• Positivo: as bactérias estão presentes e a importância depende se o tipo de amostra seleccionada é adequado.
• Negativo: Negativo ou infecção muito antiga para detectar a bactéria.

Serotipado – PCR

• Identificação adequada do serotipo ou identificado como não tipicável (comum).

Cenário

Porcos desmamados com poliserosite:

• Para cada porco afectado, recolher zaragatoas individuais de exsudado fibrinoso, colocar em meios de transporte Amies e enviar as amostras refrigeradas para o laboratório para cultura bacteriana, susceptibilidade antimicrobiana e PCR. Realizar testes individuais em cada amoestra, não as agrupar.