Diagnóstico laboratorial: Peste Suína Africana

Testes disponíveis

O gráfico abaixo mostra as mudanças na concentração (eixo Y) ao longo do tempo (eixo X) dos diferentes analitos usados ​​nos ensaios. Após a exposição, a viremia começará em 1 ou 2 dias e durará 3-4 semanas. A soroconversão (detecção de anticorpos) geralmente ocorre até 14 dias após a exposição e dura muitos meses ou anos.

Reacção em cadeia da polimerase (PCR)

• Detecta a presença de sequências específicas de ácido nucleico viral (ADN).
• Tipos de amostras: soro, sangue ou tecidos.
• Prós:
  • Método mais sensível e preferido para detectar o agente.
  • Custo moderado:
    • Frequentemente podem ser agrupadas amostras para reduzir o custo e minimizar a perda de sensibilidade.
• Contras:
  • Requer primers (iniciadores) adequados.

Hemadsorção (HAT)

• Detecta a presença de vírus através da união dos eritrócitos à membrana externa (citoplasmática) dos macrófagos suínos infectados com o vírus da PSA.
• Tipos de amostras: soro ou plasma.
• Prós:
  • Um dos testes de referência standart.
• Contras:
  • Algumas estirpes de campo não induzem hemadsorção e os resultados negativos costumam requerer confirmação através de PCR.

Ensaio por imunoabsorção ligado a enzimas de detecção de antigénios (Ag-ELISA)

• Detecta a presença do agente.
• Tipos de amostras: geralmente sangue e possivelmente outros tecidos específicos (seguir as recomendações do kit).
• Prós:
  • Kits comerciais disponíveis.
  • Relativamente barato.
• Contras:
  • Muito menos sensibilidade que PCR.
  • Não é recomendável agrupar amostras.
  • Resultados negativos normalmente requerem confirmação através de PCR.

Ensaio por imunoabsorção ligado a enzimas de detecção de anticorpos (Ab-ELISA)

• Detecta a presença de anticorpos.
• Tipos de amostras: soro ou plasma.
• Prós:
  • Os animais permanecem positivos durante vários meses ou anos.
  • Pode ser utilizado em casos crónicos.
  • Pode ser utilizado em casos de baixa virulência/sub-clínicos.
  • A seroconversão ocorre em 7 a 10 dias.
  • Actualmente não há vacinas comerciais disponíveis que confundem a interpretação dos resultados.
• Contras:
  • Os animais demoram entre 7 a 10 dias a tornar-se seropositivos.
  • Não distingue entre anticorpos maternos e exposição.

Anticorpos fluorescentes indirectos (IFA)

• Detecta a presença de anticorpos.
• Tipos de amostras: soro ou plasma.
• Prós:
  • Prova confirmatória em amostras inesperadamente positivas a ELISA.
• Contras:
  • Requer que os animais tenham estado infectados durante pelo menos 1 semana.
  • Não é possível para um grande número de amostras.
  • Os resultados dependem da estirpe vírica usada na análise.
  • A fiabilidade depende muito da capacidade dos técnicos.

Imunoperoxidase indirecta (IPT)

• Detecta a presença de anticorpos.
• Tipos de amostras: soro ou plasma.
• Prós:
  • Análise confirmatória em amostras inesperadamente positivas a ELISA.
  Contras:
  • Requer que os animais tenham estado infectados durante pelo menos 1 semana.
  • Não é possível para um grande número de amostras.
  • Os resultados dependem da estirpe vírica usada na análise.
  • A fiabilidade depende muito da capacidade dos técnicos.

Interpretação de resultados:

Frequentemente, são necessários vários testes para proporcionar uma melhor interpretação do diagnóstico de PSA.

Tabela 1. Interpretação dos resultados diagnósticos de PSA. Fonte: Laboratório de referência da União Europeia para a Peste Suína Africana.

Análise	Resultado	Cenários mais prováveis
PCR	Fraco (Ct>35)	O animal foi infectado recentemente e ainda não foi seroconvertido (<7 dias). Os sinais clínicos podem não ser evidentes.
Ab-ELISA	Negativo
IPT	Negativo
PCR	Positivo	O animal foi infectado recentemente, tem sinais clínicos e está a iniciar a seroconversão (7-10 dias).
Ab-ELISA	Negativo
IPT	Positivo
PCR	Positivo	a) Infecção em curso. O animal continua virémico com sinais clínicos e já seroconverteu (> 10 dias). b) Reinfecção de um animal com anticorpos preformados de uma infecção anterior (porco recuperado, sobrevivente). O título de IPT oferecerá informação sobre o momento da infecção.
Ab-ELISA	Positivo
IPT	Positivo
PCR	Fraco (Ct>35) ou Negativo	a) Infecção anterior. O animal recuperou-se de uma infecção aguda ou subaguda e pode que não presente sinais clínicos. b) O animal foi infectado com uma estirpe atenuada (com ou sem sinais clínicos). c) Reinfecção de um animal com anticorpos preformados de uma infecção anterior (porco recuperado, sobrevivente). O título de IPT oferecerá informação sobre o momento da infecção.
Ab-ELISA	Positivo
IPT	Positivo

PCR

• Positivo: O vírus está presente; infecção actual.
• Negativo: Negativo ou o vírus não é detectado se a análise é realizada muito depois de infecção.

HAT

• Positivo: O vírus está presente; infecção actual.
• Negativo: Negativo, infecção com uma estirpe não hemadsorbente ou o vírus não é detectado se a análise se realiza muito depois da infecção. Deve ser confirmado o negativo através de PCR.

Ag-ELISA

• Positivo: O vírus está presente; infecção actual.
• Negativo: Negativo, vírus presente mas em concentrações baixas ou o vírus não é detectado se a análise se realiza muito depois da infecção. Deve ser confirmado o negativo através de PCR.

Ab-ELISA

• Positivo: Anticorpos maternais ou exposição anterior (>7-10 dias) a vírus campo.
• Negativo: Negativo ou infecção a vírus de campo demasiado recente para ser detectada.

IFA

• Positivo: Anticorpos maternais ou exposição anterior (>7-10 dias) a vírus campo.
• Negativo: Negativo ou infecção a vírus de campo muito recente para ser detectada.

IPT

• Positivo: Anticorpos maternais ou exposição anterior (>7-10 dias) a vírus campo.
• Negativo: Negativo ou infecção a vírus de campo muito recente para ser detectada.

Cenários

É importante ter em coenta que alguns países podem exigir a aprovação da autoridade competente antes de poder realizar análise de PSA.

Suspeita de surto agudo de PSA em porcos de qualquer idade

• Recolhe sangue de vários animais afectados e analisa através de PCR; pode considerar-se agrupar amostras.
• Recolhe baços e amígdalas de porcos mortos e analisa-os através de PCR; pode considerar-se agrupar amostras.

Suspeita de circulação crónica de PSA em porcos de qualquer idade sem mortalidade

• Recolhe sangue de 30 porcos com sinais clínicos (amostragem dirigida) ou seleccionados aleatoriamente (sem sinais clínicos) e analisá-la através de PCR (podes considerar-se agrupar amostras) e individualmente mediante Ab-ELISA.