Diagnostyka laboratoryjna: Glaesserella (Haemophilus) parasuis (choroba Glässera)

Dostępne testy:

Hodowla bakteryjna

• Izolacja żywego organizmu
• Rodzaje próbek: włóknikowy wysięk lub miąższ płuca lub zajętego narządu
• Zalety:
  • Dostępna w większości laboratoriów
  • Może znacznie zwiększyć wskaźnik powodzenia izolacji dzięki wykorzystaniu wymazów z pożywką transportową Amies i przetrzymaniu próbek w lodówce
  • Stosunkowo niski koszt
  • Hodowla specyficznego izolatu ze stada przydatna do:
    • Serotypowania
    • Określania wrażliwości na środki przeciwdrobnoustrojowe
    • Izolatu do produkcji szczepionek
• Wady:
  • Bakterie są trudne do hodowli ze względu na wymagający jej charakter i ograniczoną przeżywalność w temperaturze pokojowej
  • Nie wszystkie izolaty G. parasuis są patogenne
  • Bakterie mogą się nie namnożyć, jeśli świnie są wcześniej leczone antybiotykami

Wrażliwość na środki przeciwdrobnoustrojowe

• Testuje zdolność żywych organizmów do wzrostu in vitro w określonych stężeniach różnych środków przeciwdrobnoustrojowych
• Rodzaje próbek: włóknikowy wysięk lub miąższ płuca lub zajętego narządu
• Zalety:
  • Identyfikacja wrażliwości lub oporności określonego izolatu na powszechnie stosowane środki przeciwdrobnoustrojowe
  • Identyfikacja trendów oporności na środki przeciwdrobnoustrojowe
• Wady:
  • Wymaga izolatu bakteryjnego
  • Testy in vitro mogą nieznacznie różnić się od wyników in vivo
  • Niektóre określone środki przeciwdrobnoustrojowe mogą nie być dostępne do testowania lub mogą wymagać oddzielnych, specjalnych testów
  • Umiarkowany koszt

Reakcja łańcuchowa polimerazy (PCR)

• Wykrywa obecność określonej sekwencji bakteryjnego kwasu nukleinowego (DNA)
• Rodzaje próbek: włóknikowy wysięk lub miąższ płuca lub zajętego narządu
• Zalety:
  • Bardzo wysoka czułość (może wykryć niewielkie ilości bakterii)
  • Potrafi wykryć martwe bakterie, co eliminuje problem z hodowlą ze względu na wymagający charakter i ograniczone przeżycie w temperaturze pokojowej
  • Wczesne wykrycie – przypadki ostre powinny być dodatnie
  • Umiarkowany koszt
• Wady:
  • Nie zawsze dowodzi patogeniczności lub zjadliwości izolatu
  • Organizm powszechnie występujący jako patogen zakażeń wtórnych lub koinfekcji
  • Należy użyć odpowiednich starterów

Serotypowanie – PCR

• Technika reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR), która wykrywa obecność określonej sekwencji kwasów nukleinowych (DNA) powiązanej ze znanymi genami wirulencji
• Zalety:
  • Nie wymaga przechowywania antysurowicy, jak w przypadku tradycyjnego serotypowania serologicznego
  • Pomaga w odpowiednim doborze szczepionki lub produkcji autogennej (pasujący serotyp)
• Wady:
  • Wymaga izolatu bakteryjnego
  • Istnieje wiele nietypowalnych izolatów
  • Umiarkowana cena, ale zwykle tylko 1 izolat

Interpretacja wyniku:

Hodowla bakteryjna:

• Ilość:
  • Duża:wysoce sugerująca przyczynę choroby
  • Umiarkowana: wysoce sugerująca przyczynę choroby
  • Niska: interpretacja zmienna
  • Brak wzrostu: zwierzę prawdopodobnie wcześniej leczone antybiotykami, przewlekła infekcja, niewłaściwe postępowanie z próbkami lub bakterie nie mają istotnego wkładu

Wrażliwość na środki przeciwdrobnoustrojowe:

• Wrażliwe: możliwy dobry wybór do leczenia, jeśli środek przeciwdrobnoustrojowy może dotrzeć do tkanki docelowej
• Odporne: wybierz inny środek przeciwdrobnoustrojowy
• MIC: wartości MIC są wykonywane w celu zapewnienia, że wybrany środek przeciwdrobnoustrojowy osiągnie wymienioną wartość MIC w narządzie docelowym

PCR:

• Dodatni: obecność organizmu i istotność zależy od odpowiedniego typu wybranej próbki
• Ujemny: wynik ujemny lub bakterie mogły zostać pominięte, jeśli badanie nastąpi późno po zakażeniu

Serotypowanie – PCR

• Właściwa identyfikacja serotypu lub zidentyfikowany jako nietypowalny (powszechny)

Możliwe scenariusze

Prosięta odsadzone z zapaleniem błon surowiczych:

• W przypadku każdej chorej świni należy pobrać pojedynczo wymazy włóknikowatego wysięku i umieścić w pożywce transportowej Amies, a następnie wysłać schłodzone próbki do laboratorium w celu przeprowadzenia hodowli bakteryjnej, wrażliwości na środki przeciwdrobnoustrojowe i przeprowadzenia testu PCR. Wykonaj indywidualne testy na każdej próbce; nie puluj ich.