Genetycznie zmodyfikowane świnie są chronione przed konsekwencjami zakażenia wirusem klasycznego pomoru świń

Klasyczny pomór świń (CSF) wywołany przez wirusa klasycznego pomoru świń (CSFV) jest jedną z najbardziej szkodliwych chorób i prowadzi do znacznych strat gospodarczych w przemyśle trzody chlewnej. Pomimo wysiłków wielu władz mających na celu wyeliminowanie choroby z krajowych populacji świń, choroba ta jest nadal powszechna.

W tym przypadku wybrano antywirusowe małe RNA o strukturze spinki do włosów (shRNA), a następnie wstawiono je do lokus Rosa26 (pRosa26) za pomocą strategii knock-in za pośrednictwem CRISPR / Cas9. Wreszcie, transgeniczne świnie (TG) anty-CSFV wytworzono za pomocą somatycznego transferu jądrowego (SCNT).

Postanowiliśmy przeprowadzić eksperymenty na zwierzętach zakażanych "przez kontakt". Następnie wszystkie świnie zostały losowo podzielone do dwóch oddzielnych pomieszczeń. W każdym pomieszczeniu znajdowała się jedna świnia non-TG, wykorzystana do zakażenia CSFV (NTG-In), trzy świnie NTG i trzy świnie TG. Po trzech dniach aklimatyzacji, świnie NTG-In poddano zakażeniu CSFV przez iniekcję domięśniową, podczas gdy pozostałe świnie nie zostały zakażone, aby można było naśladować naturalne rozprzestrzenianie się CSFV przez kohabitację. W trakcie zakażenia kliniczne objawy związane z CSFV (w tym letarg i krwawienie), śmiertelność i wiremię u zakażonych świń były monitorowane i rejestrowane codziennie. Wyniki wykazały, że wszystkie świnie NTG rozwinęły typowe objawy infekcji CSFV, ze wskaźnikiem śmiertelności wynoszącym 100%. Chociaż objawy kliniczne związane z CSFV obserwowano również u świń z TG, objawy te nie były poważne, a poziomy wirusa we krwi były niższe u świń TG niż u świń NTG.

Dalsze testy prowokacji wirusowej in vitro i in vivo wykazały, że świnie TG mogą skutecznie ograniczać replikację CSFV, zmniejszać objawy kliniczne i śmiertelność związane z CSFV, a odporność na choroby może być stabilnie przenoszona do pokolenia F1.

Podsumowując, nasza praca wykazała, że technologia interferencji RNA (RNAi) łącząca technologię CRISPR / Cas9 dała możliwość produkcji zwierząt TG o zwiększonej odporności na infekcje wirusowe.

Zastosowanie świń TG może zmniejszyć straty ekonomiczne związane z CSF, a ta strategia antywirusowa może być przydatna w przyszłych badaniach antywirusowych.