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Artículo comentado
Shuhan L, Fang L, Qiubing C, Jing W, Junyi D, Xinlin L, Ying Z, Dongming Z, Zhigao B, Hao Y. Rapid detection of African swine fever virus using Cas12a-based portable paper diagnostics. Cell Discovery. 2020; 6:18. https://doi.org/10.1038/s41421-020-0151-5
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Comentario
En estos días que corren nos hemos acostumbrado a oír hablar de pruebas rápidas de diagnóstico, y no precisamente por desarrollos aplicados al mundo del cerdo sino, por la pandemia de COVID-19 en la que estamos sumergidos. Las pruebas rápidas de detección de patógenos nunca han tenido mucha aceptación en nuestro sector, quizás solo en el diagnóstico de procesos diarreicos. En procesos digestivos, a pesar de que su fiabilidad es buena, es posible que el veterinario considere menos urgente un diagnóstico certero que la aplicación de medidas correctoras que, en muchos casos, no serán tan distintas incluso aún teniendo distintos diagnósticos. Sin embargo, en este caso, la prueba rápida estaría destinada al diagnóstico de una enfermedad de declaración obligatoria como es la Peste Porcina Africana (PPA). Por la información del artículo, parecería que esta prueba rápida sería capaz de detectar incluso pequeñas cantidades de virus (a partir de 200 partículas víricas), con lo que sería muy sensible y específica, pues por las pruebas realizadas no reaccionaría a otros virus (ni de los que afectan al porcino ni a los que afectan al hombre); y además podría tener un coste reducido. Pero ¿aporta alguna ventaja a las pruebas disponibles en la actualidad?
La realidad es que la única ventaja sería la rapidez y la posibilidad de llevarla a cabo directamente en el campo. Tratándose de una prueba destinada al diagnóstico de una enfermedad de declaración obligatoria (incluida en la lista A de enfermedades de la OIE) su uso quedaría reducido a aquellos organismos oficiales responsables de la sanidad animal en los distintos países. En tal caso, la rapidez no representaría una ventaja remarcable, pues tras la sospecha de una infección el primer paso sería el confinamiento de la granja (prohibiéndose cualquier movimiento de animales) e inmediatamente después, la toma de muestras para confirmación o no de la sospecha. En este tipo de situaciones es más importante la fiabilidad que la rapidez. Estamos hablando de acelerar el proceso diagnóstico horas o como mucho algún día, lo que no cambiaría sustancialmente la situación. Un diagnóstico positivo conlleva el sacrificio obligatorio de todos los animales de la granja y me cuesta imaginar la aplicación de tal medida a partir de un diagnóstico realizado directamente en explotación y sin la confirmación en laboratorio por PCR (técnica reconocida por la OIE).
La PPA no es una zoonosis y, en consecuencia, no representa una amenaza para la salud de las personas. Si nos imaginamos una situación (como la que algunos ya aventuran) donde la enfermedad fuese endémica y su declaración no comportase el sacrificio obligatorio de los cerdos, las pruebas diagnósticas quedarían liberadas. En una situación de endemia habría que esperar una reducción de la virulencia del virus y, por lo tanto, una mayor dificultad diagnóstica solo por sintomatología clínica. Nos podríamos incluso imaginar que existiese y estuviera disponible en el mercado una vacuna de PPA. En este supuesto, la velocidad, comodidad y coste reducido del diagnóstico, si que representarían una ventaja para tener en cuenta. Una prueba rápida de diagnóstico en campo permitiría aplicar rápidamente todas aquellas medidas de bioseguridad encaminadas a reducir su difusión y, porque no, valorar la posibilidad de aplicar la vacuna a explotaciones vecinas para evitar consecuencias peores.
Pero volvamos a la realidad. En las condiciones actuales, mucho me temo, que la diferencia en la lucha contra la Peste Porcina Africana no vendrá determinada por la velocidad y comodidad de su diagnóstico, sino por la aplicación de otras medidas que en algunos países pasan por ser prioritarias, como es el control de la producción no industrial (mal llamada auto-consumo) y de los mercados alternativos que todavía permiten la matanza y comercialización de animales positivos.
Resumen del artículo comentado
El virus de la peste porcina africana (PPA) es un virus ADN bicatenario responsable de una enfermedad grave, muy contagiosa y letal que afecta tanto a cerdos salvajes como domésticos. La PPA ha comportado enormes pérdidas económicas a varios países y todavía no existe una vacuna o terapia efectiva. Por lo tanto, para su vigilancia y control, es importante una detección rápida, sensible y realizable en condiciones de campo. Aquí desarrollamos un test portátil en papel mediado por Cas12a para detectar el virus de la PPA de una forma rápida y precisa. Identificamos un conjunto robusto de crRNAs que reconocían la región altamente conservada de genes esenciales del virus de la PPA. El kit de detección mediado por Cas12a mostró una baja tolerancia a mutaciones de divergencia y no presentó reactividad cruzada frente a otros patógenos porcinos comunes. Además, desarrollamos un kit basado en papel que permite una detección de PPA sin instrumentos. Específicamente, aplicamos un conjugado de anticuerpos con nanopartículas de oro para diseñar tiras caseras y las combinamos con la detección mediada por Cas12a. Estas tiras de papel permiten un diagnóstico sin equipo, y detectaron eficazmente el virus de la PPA en muestras de cerdos, mostrando una sensibilidad comparable a las PCR tradicionales, que sí que necesitan de equipo. En conjunto, desarrollamos un método diagnóstico del virus de la PPA mediado por Cas12a, con mucha sensibilidad, instantáneo y económico mediante tiras de papel, con un gran potencial de aplicación para la monitorización de la PPA en campo. |
