Un focolaio, due destini: come l'emergenza biologica ha accelerato la ripresa di un Centro di Inseminazione Artificiale

Il monitoraggio interno per la PRRS stabilito in questo CIA si basa su:

• Dimensione del campione settimanale: basata sul raggiungimento di un livello di confidenza del 95% nel rilevamento per una prevalenza stimata del 2%. I campioni vengono prelevati distribuiti su 3 giorni a settimana.
• Tipo di campione: sangue in provetta dalla vena safena, poiché è considerato il campione più sensibile (vedi articolo Rilevamento della PRRS nei verri in base al tipo di campione)
• Test eseguiti: PCR della PRRS

Introduzione: Quando la PRRS si manifesta

Il 7 aprile 2024, durante i regolari controlli del Centro, due campioni PCR risultati positivi al virus della sindrome riproduttiva e respiratoria suina (PRRSv) in verri provenienti da uno dei due reparti, hanno fatto scattare l'immediata attuazione del Protocollo di Emergenza:

• Chiusura sanitaria del CIA
• Ritiro di tutte le dosi prodotte
• Verifica delle dosi ritirate tramite PCR con risultati negativi
• Attuazione del Piano di Emergenza per garantire che i clienti non rimangano senza dosi.

Avere a disposizione un laboratorio operativo durante la notte ha permesso di procedere rapidamente con le analisi. I risultati dei test condotti tra il 7 e l'8 aprile sul 100% degli animali hanno confermato i timori: 11 dei 261 verri del Padiglione 2 sono risultati positivi al virus tramite PCR. Al contrario, nessuno dei 267 animali del Padiglione 1 è risultato positivo.

Questa scoperta segnò una svolta: da quel momento in poi, iniziò una corsa contro il tempo per:

• Contenere l'epidemia prevenendo l'infezione da N1 da parte di N2
• Preservare il patrimonio genetico
• Riavviare la produzione il prima possibile.

Strutturalmente, l'edificio N1 ha un sistema a lettiera profonda, mentre l'edificio N2 ha un sistema di grigliato completo. Entrambi gli edifici sono identici e situati parallelamente l'uno all'altro, separati da 10 metri. Entrambi sono dotati di ventilazione a pressione negativa con estrazione all'estremità di ciascun edificio e unità di raffreddamento nelle prese d'aria laterali, ma queste non sono filtrate.

Prima dell'epidemia, il personale di ciascun edificio lavorava in modo indipendente, ma il flusso di accesso era condiviso da tutto il personale. Le docce erano disponibili all'ingresso e all'uscita della struttura ed era consentito l'accesso all'edificio N1. Successivamente, i lavoratori dell'edificio N2 si sono recati al loro edificio indossando abiti e calzature da "trasferimento". Una volta entrati, hanno effettuato una doccia "a secco" completa (cambiandosi abiti e calzature) negli spogliatoi con aree chiaramente definite per indumenti puliti e sporchi (Figura 1).

Misure di emergenza chirurgica

Fin dal primo giorno, la priorità era chiara: mantenere N1 indenne da PRRS per poter riprendere la produzione il prima possibile. Per raggiungere questo obiettivo, sono state implementate misure differenziate e ad alta precisione:

Isolamento immediato e zonizzazione interna

• La comunicazione tra N1 e N2 è stata completamente bloccata dal momento del primo risultato positivo.
• Sono stati implementati flussi separati e indipendenti per personale, compiti, materiali e rifiuti. Dall'8 aprile, l'accesso a N2 è stato reso possibile dall'esterno, con una doccia di ingresso e una di uscita disponibili (Figura 2).
• Tra il 9 e il 12 aprile, la N2 è stata svuotata dagli animali grazie a un notevole sforzo logistico.

Biosicurezza strutturale e ambientale dopo lo svuotamento di N2

• La ventilazione di N2 è stata chiusa e quella di N1 è stata ridotta al minimo (figura 3)
• Si è deciso di non iniziare immediatamente la pulizia del N2 con il metodo tradizionale (acqua pressurizzata) per evitare la formazione di aerosol che avrebbero potuto raggiungere N1. La materia organica è stata rimossa manualmente dai grigliati e versata nelle fosse. Il reparto è stato pulito manualmente durante la prima settimana di vuoto.
• Durante la seconda e la terza settimana successive allo svuotamento, è iniziata la disinfezione senza lavaggio o idropulitura. L'obiettivo era ridurre la carica virale nell'ambiente prima di decidere di utilizzare l'idropulitura. Nella terza settimana, sono stati prelevati campioni ambientali (38 tamponi) dalle stalle dei maschi problematici e sono stati eseguiti test PCR individuali sui campioni, tutti risultati negativi.
• Durante la quarta e la quinta settimana successive allo svuotamento, è stato applicato calore tramite fiamma a tutte le superfici dell'N2 e al termine della quinta settimana sono stati prelevati nuovamente campioni ambientali (25 tamponi) con risultati negativi.

• Nella 5ª settimana, è iniziata la vendita del seme proveniente dalla stalla N1, dopo due prelievi di sangue ufficiali effettuati sul 100% dei verri presenti e analisi settimanali condotte fino a quella data sul 50% dei verri presenti, tutte con esito negativo ai test PCR ed ELISA. Mentre proseguivano le operazioni di lavaggio e disinfezione della stalla N2, tutti i verri raccolti nella stalla N1 sono stati analizzati mediante PCR prima della distribuzione delle dosi.
• Nella sesta settimana è iniziata la pulizia profonda con acqua pressurizzata.
• Nella settima settimana, con il reparto N2 pulito e disinfettato, è iniziato il periodo di svuotamento sanitario dello stesso.

Gestione della pulizia: biocontenimento

• Le tubature e i tombini del N2 sono stati sigillati fisicamente per impedire la fuoriuscita di aerosol quando sono iniziate le operazioni di pulizia e si è reso necessario aprire i tombini delle fosse.
• Una struttura di plastica è stata posizionata sui quattro aspiratori dell'edificio N2 per deviare l'aria in uscita verso il pavimento, dove sono state collocate delle grandi vaschette contenenti disinfettante virulicida (foto 1 e 2).
• In N1, tutti i punti di ingresso dell'aria (con unità di raffreddamento) sulla parete opposta a N2 sono stati sigillati con plastica per impedire l'ingresso di aria e particelle (foto 3). Sulla parete opposta, dove l'aria entrava in N1, le unità di raffreddamento sono state attivate, ma con l'aggiunta di un disinfettante virucida all'acqua di circolazione, che veniva cambiata ogni 4 giorni.

Ripristino operativo graduale

• Il 12 maggio è stata ufficialmente autorizzata l'apertura alla vendita degli animali del Centro (animali N1).
• N2 è rimasto inattivo fino alla sua pulizia e disinfezione, al periodo di vuoto sanitario, all'ingresso delle sentinelle e al nuovo ingresso degli animali.

Settimana	REPARTO 1	REPARTO 2
0	7 aprile 0 PCR+ 8 aprile 0 PCR+ nei 267 verri	7 aprile: 2 PCR+ 8 aprile: 11 PCR+ nei 261 verri Chiusura sanitaria, Ritiro e analisi di tutte le dosi prodotte tramite PCR (che hanno dato esito negativo), attivazione del piano di emergenza per garantire la continuità delle forniture ai clienti. 9-12 aprile: vuotato il reparto
1	Test Ufficiali del 100% dei verri con PCR e test privato del 50% con PCR e ELISA con resultati negativi	Rimozione manuale della materia organica alla fossa
2	Test Ufficiale del 100% dei verri con PCR Test privato del 50% con PCR e ELISA con risultati negativi	Disinfettare senza lavare e senza esercitare pressione per evitare la formazione di aerosol.
3	Test privato del 50% dei verri con PCR e ELISA con risultato negativo	Raccolta di 38 campioni ambientali e analisi PCR individuali con risultati negativi. Obiettivo: prelevare campioni dalle stalle dei maschi risultati positivi.
4	Test privato del 50% dei verri con PCR e ELISA con risultato negativo. 12 maggio: L'apertura delle vendite delle dosi N1 è stata ufficialmente autorizzata	Applicazione calore con una fiamma a tutte le superfici Sono stati prelevati 25 campioni ambientali e analizzati mediante test PCR individuali, con risultati negativi.
5	Test privato del 100% dei verri per PCR e ELISA prima dell'uscita delle dosi
6	Test privato del 100% dei verri con PCR e ELISA prima dell'uscita delle dosi	Inizio della pulizia profonda con acqua pressurizzata
7		Inizio del periodo di vuoto sanitario
8
9		Programma delle sentinelle: trasferimento di 12 verri da N1 a N2 per l'abbattimento selettivo. Rotazione attraverso il 100% dei box.
10		PCR e ELISA negativo delle sentinelle
11		Riempimento del Reparto

* tutti gli esami del sangue.

Monitoraggio settimanale della dimensione del campione per un intervallo di confidenza del 95% e una prevalenza del 2%, distribuito su 3 giorni di campionamento. Tipo di campione: sangue della vena safena, Test: PCR.

L'indagine: rintracciare il percorso invisibile del virus

È stata condotta un'indagine epidemiologica dettagliata, focalizzata sui giorni precedenti all'individuazione del virus. Sono stati analizzati gli accessi del personale, le visite tecniche, il trasporto di animali, la rimozione delle carcasse e gli spostamenti interni, nonché le condizioni meteorologiche.

Sono emersi diversi elementi come possibili punti di ingresso:

• L'utilizzo di un nuovo trattore (incorporato il 16 marzo) per il trasporto delle carcasse in entrambi gli edifici fino al punto di estrazione situato a 500 m dall'esterno della proprietà, con possibili errori nel transito tra le aree sporche e grigie dell'allevamento e l'accesso al contenitore delle carcasse.
• Attività di manutenzione sugli impianti di raffreddamento effettuate il 19 e il 26 marzo, con frequenti accessi e uscite di personale attraverso aree critiche.
• Nei giorni precedenti all'individuazione dell'infezione si sono verificate precipitazioni e un calo delle temperature, condizioni che avrebbero favorito la persistenza del virus nell'ambiente qualora fosse stato trasportato nelle vicinanze dell'allevamento.

Nonostante gli sforzi, non è stato possibile confermare un'unica fonte. La sequenza genetica del virus isolato presso il CIA è stata inserita in GenBank e corrispondeva a ceppi provenienti da un allevamento situato in una città a 38 km di distanza e in una zona ad alta densità di suini.

Lezioni apprese: misure preventive per il futuro

Il focolaio ha messo in luce delle lacune operative che hanno portato all'elaborazione di un piano completo per miglioramenti permanenti:

• Modifica del metodo di smaltimento delle carcasse: il tradizionale sistema di raccolta da parte di un'azienda esterna è stato abbandonato a favore di un processo di idrolisi.
• Nuove telecamere di videosorveglianza: le immagini vengono trasmesse in tempo reale ai dispositivi mobili del personale sanitario, migliorando la tracciabilità dei flussi di persone all'esterno degli edifici e presso i punti di accesso esterni.
• Riprogettazione degli accessi: dall'inizio del focolaio, entrambi gli edifici sono rimasti completamente indipendenti per l'ingresso di personale, materiali, ecc...
• Ambulatorio veterinario in loco: il veterinario della società madre ora ha una presenza fisica all'interno del GTC, migliorando la supervisione immediata.

Conclusione: il contenimento è stato possibile grazie a un piano

Il caso di questo CIA dimostra che, anche di fronte a un'infezione silenziosa e potenzialmente devastante come la PRRS, la combinazione di una risposta rapida, misure chirurgiche e biosicurezza adattiva può fare la differenza. La consapevolezza del personale durante le fasi di depopolamento, pulizia, disinfezione, ripopolamento e riavvio è stata fondamentale.

Grazie alla conservazione del reparto N1, il CIA ha ridotto significativamente i tempi di inattività ed evitato di compromettere la fornitura genetica.

In un contesto di elevata densità di suini, movimenti costanti e virus altamente contagiosi, gli allevamenti devono prepararsi all'imprevedibile. Disporre di un solido Protocollo di Emergenza non è un'opzione, ma la linfa vitale di qualsiasi attività.