Diagnosi di laboratorio: Salmonella

Test disponibili:

Coltura batterica

• Isolamento di organismi viventi in tessuti con lesioni.
• Tipi di campioni: feci, sangue, milza, polmone, fegato, linfonodi.
• Pro:
  • I batteri sono facili da coltivare entro 1-2 giorni nei casi acuti.
  • Facile da fare in qualsiasi laboratorio (anche interno).
  • Costo relativamente basso.
• Contro:
  • Può essere necessario un arricchimento selettivo per i campioni di sangue.
  • Se i suini sono stati precedentemente trattati con antibiotici, questo può prevenire la crescita batterica.
  • Le feci non sono affidabili per la diagnosi di casi sistemici.
  • L'escrezione dei batteri non è costante; ma intermittente nel tempo.

Sensibilità antimicrobica (antibiogramma)

• Test in vitro: capacità di un organismo vivente di crescere sotto specifiche concentrazioni di diversi antimicrobici.
• Tipi di campioni: feci, sangue, milza, polmone, fegato, linfonodi.
• Pro:
  • Identificazione della suscettibilità o resistenza di ceppi specifici ai comuni antimicrobici.
  • Identificazione dei trend di resistenza agli antimicrobici.
• Contro:
  • Richiede un isolato batterico.
  • I test in vitro possono differire leggermente dai risultati in vivo.
  • Alcuni antimicrobici specifici potrebbero non essere elencati o potrebbero richiedere test speciali separati.
  • costo moderato.

Sierotipizzazione batterica

• Il sierogruppo si basa sull'identificazione di diversi antigeni O e H negli isolati di Salmonella.
• Pro:
  • La sierotipizzazione può essere eseguita da:
    • Uso di diversi antisieri.
    • Una tecnica di reazione a catena della polimerasi (PCR) che rileva la presenza di sequenze di acido nucleico (DNA) specifiche associate ad antigeni specifici.
    • Uso di microarray per rilevare sequenze di DNA specifiche per antigeni specifici.
  • Aiuta a identificare la patogenicità dell'isolato batterico in base alla sierotipizzazione associata ad antigeni specifici.
• Contro:
  • Richiede un isolato batterico.
  • Costo moderato.

Saggio di immunoassorbimento enzimatico (ELISA Enzyme-linked immunosorbent assay)

• Rileva la presenza di anticorpi.
• Tipi di campioni: siero o fluidi orali.
• Pro:
  • Gli animali rimangono positivi per diverse settimane.
  • Può essere utilizzato nei casi cronici.
  • I campioni accoppiati possono essere utilizzati per confermare un'infezione recente.
• Contro:
  • Anticorpi specifici e tempi di rilevamento possono variare leggermente tra i vari kit commerciali disponibili.
  • Gli animali possono impiegare da un minimo di 3-4 giorni a più di 3 settimane per diventare sieropositivi; il tempo varia in base al sierotipo ed alla dose di esposizione.
  • Non distingue tra vaccinazione e infezione da batteri di campo.
  • Non esiste una risposta sierologica coerente all'infezione; diversi sierotipi e diverse dosi di infezione influenzano la risposta immunitaria.
  • Gli anticorpi materni possono complicare l'interpretazione dei risultati all'inizio dello svezzamento.

Interpretazione dei risultati:

Coltura batterica:

• Quantità:
  • Da moderata ad alta: altamente indicativo del fatto che stia contribuendo alla malattia.
  • Bassa: valore discutibile (potrebbe essere un contaminante o un sierotipo non patogeno)
  • Nessuna crescita: animale eventualmente precedentemente trattato con antibiotici, in quel momento non si verifica l'escrezione (escrezione intermittente) o i batteri non contribuiscono alla malattia.

Sensibilità antimicrobica (antibiogramma):

• Sensibile: Possibile buona scelta per il trattamento se l'antimicrobico può raggiungere il tessuto bersaglio.
• Resistente: selezionare un antimicrobico diverso.
• MIC: se viene eseguita la MIC (concentrazione inibitoria minima), è necessario assicurarsi che l'antimicrobico selezionato raggiunga il valore di MIC indicato nell'organo bersaglio.

Sierotipizzazione:

• La sierotipizzazione consente il raggruppamento per sierotipi, il che è molto prezioso per identificare l'importanza dell'isolato.

Tabella con i sierotipi più comuni di Salmonella e i rispettivi sierogruppi.

Gruppo B	Gruppo C1	Gruppo D
Derby	Choleraesuis	Dublin
Heidelberg	Infantis	Enteritidis
Typhimurium	Newport

ELISA

• Positivo:
  • Pregressa esposizione a vaccini o batteri di campo.
  • Campioni di siero accoppiati a distanza di due o tre settimane possono essere utilizzati per confermare un'infezione recente.
• Negativo:
  • Negativo al vaccino o ai batteri di campo.
  • Infezione troppo recente per essere rilevata.
  • Dose di esposizione bassa.
  • Infezione con sierotipi lievi.
  • L'uso di antibiotici può inibire la crescita batterica, determinando una dose di esposizione inferiore e una risposta immunitaria inferiore.

Scenari:

Suini da ingrasso con diarrea (acuta o cronica):

• Raccogliere campioni fecali da 10 o più suini diarroici non trattati con antibiotici e sottoporli a coltura batterica e sensibilità in pool di 5.
• Inviare campioni positivi alla Salmonella per la sierotipizzazione..

Suini da ingrasso con malattia sistemica (con o senza diarrea):

• Necroscopia 1-3 suini morti di recente o eutanasia suini con diarrea. Raccogliere campioni di tessuto per la coltura batterica (milza, fegato, linfonodi gastroepatici).

Determinazione del momento dell'esposizione:

• Raccogliere campioni da 10-15 suini a 8, 12, 16 e 20 settimane di età:
  • Due approcci al campionamento:
    • Trasversale: raccogli contemporaneamente da diversi gruppi di età (i risultati si ottengono più velocemente).
    • Longitudinale - raccogliere dagli stessi suini nel tempo (si ottengono risultati più accurati per l'interpretazione sierologica).
• Analisi individuale di campioni di siero mediante ELISA.
• Invia campioni fecali per coltura batterica e sensibilità in pool di 5 in base al gruppo di età.
• Inviare campioni positivi alla Salmonella per la sierotipizzazione.