诊断由胸膜肺炎放线杆菌引起的感染

胸膜肺炎放线杆菌可造成3种类型的感染：

1. 急性（高或中等的死亡率水平）
2. 慢性（低死亡率，少量和低特异性临床症状，生长速度和/或屠宰时病变减少）
3. 亚临床（无临床症状，屠宰时无病变）

急性型的诊断通常并不复杂

• 受感染动物通常会出现肺部病变，这是胸膜肺炎放线杆菌感染动物的特异性病症。应从受感染动物的肺脏取样并送至实验室。
• 任何具有猪细菌分离经验的诊断实验室均能正确分离和鉴别胸膜肺炎放线杆菌。但在某些欧洲国家（如西班牙，比利时，法国），存在非典型的变异菌株（称为生物型II分离株），这对一些实验室来说可能是具有挑战性的。
• 血清型鉴定可能很重要：在受感染猪群中，这些信息可显示风险水平。高毒力血清型是主要病原体; 中等毒力的血清型通常在高健康状况的猪群中或在共同感染和/或其他诱发因素的存在下导致死亡。了解血清型对于确定特定猪群使用哪种商品疫苗也是有用的。最后，有必要了解特定地区强毒血清型的分布情况，以评估亚临床感染猪群的风险（见下文）。现在通过聚合酶链反应来完成血清分型，任何诊断实验室均可进行该实验。

在某种程度上慢性形式的诊断更加困难

• 在屠宰时观察到的胸膜炎病变在某种程度上是特征性的，但不一定是特异性的。
• 在此类病变中检测胸膜肺炎放线杆菌，特别是当它们相对较长时间时，非常困难，且通常会获得假阴性结果。
• 很多时候也存在共同感染（如猪肺炎支原体），使诊断复杂化。
• 如果出现一些临床症状，首先在出现临床症状后21-28天后使用ApxIV毒素-ELISA（见下文）进行血清学检测，以确认血清转化。
• 在没有临床症状的情况下，屠宰时的病变以及明显的高ApxIV毒素-ELISA阳性结果可能是胸膜肺炎放线杆菌感染的指征：应检测25-30个血清样本。若为阳性，可以采取横断面血清样品来确认：从10-20周龄，每周一次10个样品。易受胸膜肺炎放线杆菌影响的猪群是那些血清学结果阳性，且在特定时间内增加的猪群。
• 临床症状的情况下，就某一毒力的血清型（在特定国家），在屠宰时出现以LPS为基础的酶联免疫吸附试验阳性结果（见下文）的情况下，表明胸膜肺炎放线杆菌感染。可采集屠宰时的血清样品（25-30份血清样品）。

猪的急性胸膜肺炎：经常可观察到3种病变（箭头所示）：实质区从深红色到黑色，小叶间水肿和纤维性胸膜炎。图片由Robert Desrosiers博士提供

亚临床感染猪群的诊断必须通过血清学来完成

由于缺乏临床症状和病变，诊断胸膜肺炎放线杆菌引起的亚临床感染并不容易。通常情况下，动物不受影响（饲料转化率，生长速度等）。这成为种猪群的重要问题：亚临床感染动物可能意味着“带菌动物”，可能将胸膜肺炎放线杆菌从扁桃体传播到其他更易感动物。一个强毒株可能在一个畜群中不会诱发疾病，但可能会导致另一个更易感畜群的高死亡率。即使在一个畜群中，畜群管理，环境条件或共同感染也可能将强毒株的亚临床感染转变为胸膜肺炎爆发。血清学是诊断猪群亚临床感染的重要工具。存在两个问题：

应使用哪种检测方法？

1). 有两种类型的商品ELISA检测试剂盒可用：胸膜肺炎放线杆菌特异性Apxiv检测（检测胸膜肺炎放线杆菌的所有菌株，不区分血清型）和基于LPS的血清型特异性检测（见表1）。

表1：使用商品ELISA试剂盒来检测胸膜肺炎放线杆菌抗体

	ApxIV 胸膜肺炎放线杆菌特异性ELISA	LPS血清型/血清群特异性ELISA
商品群猪	没有用（大多数猪群会产生阳性结果）	只有在测试毒血清型时才有用
高健康状况的猪群 （确认为无胸膜肺炎放线杆菌）	有用	没有用（测试所有血清型太贵）
灵敏度（实验感染后）	+++	++++
特异性（实验感染其他细菌）	++++	+++
countries用于评估几个国家种猪的常规方法	无	有

任何受胸膜肺炎放线杆菌感染猪群（毒性或非毒性毒株）的 Apxiv测试均为阳性。在大多数国家，超过70％的商品猪群的这项测试结果为阳性。基于LPS的检测应侧重最重要和最具毒性的血清型，这会给出特定猪群的风险水平。有必要了解特定国家毒力血清型的分布情况：从患病动物分离出的毒株必须进行血清型分型以提供此信息。

b) 应该采集多少样本和哪类动物来诊断感染猪群？多久检测一次猪群并被归类为“未感染猪群”？

我们推荐在育成期结束时采集约30份血清样本; 在分批分娩系统中应测试不同批次以避免假阴性结果。没有通用规则以证明一个猪群是“阴性”的，建议每年重复测试至少2-3次。

最后，对于种猪群，不确定的血清学结果可能会使诊断复杂化。在这种情况下，可通过使用PCR从血清阳性动物的扁桃体进行胸膜肺炎放线杆菌检测。如果猪群对不同的毒力和非毒力血清型呈阳性，则必须使用血清型特异性（对通过血清学检测到的强毒血清型）PCR。对于假定胸膜肺炎放线杆菌阴性的猪群，也可以使用胸膜肺炎放线杆菌特定PCR（适用于所有血清型）。 这些测试必须由经验丰富的实验室完成; 但有时会观察到假阴性或假阳性结果。