Diagnóstico laboratorial: Disenteria suína (Brachyspira hyodysenteriae)

Alejandro Ramirez
19-Jul-2023 (há 2 anos 9 meses 10 dias)

Testes disponíveis:

Cultivo bacteriano

Isolamento de organismos vivos.
Tipo de amostra: fezes.
Prós:
- Relativamente barato.
- A presença de Brachyspira spp.fortemente beta-hemolítico está associado à virulência.

Hemólise alfa, beta e gama

Tabela 1: Relação entre beta-hemólise em Brachyspira spp. e a doença.

Contras:
- Menos sensível que o teste de PCR.
- Crescimento lento (até 10 dias).
- Requer cultura anaeróbica.
- Algumas cepas menos virulentas podem ser encontradas em granjas sem sinais clínicos ou lesões.

Suscetibilidade antimicrobiana

Teste in vitro: capacidade de um organismo vivo crescer sob concentrações específicas de diferentes antimicrobianos.
Tipo de amostra: fezes.
Prós:
- Identificação da suscetibilidade ou resistência de cepas específicas a antimicrobianos comuns.
Contras:
- Requer um isolado bacteriano.
- Os testes in vitro podem diferir ligeiramente dos resultados in vivo.
- Alguns antimicrobianos específicos podem não ser incluídos ou podem exigir testes especiais separados.
- Custo moderado.
- Os resultados demoram 7 dias.

Histopatologia

Avalia a presença de lesões teciduais que podem confirmar a presença da doença.
Tipo de amostra: tecidos.
Prós:
- As lesões histopatológicas podem ser altamente sugestivas se muitas espiroquetas forem encontradas próximas às lesões intestinais.
- Pode detectar formas leves da doença.
Contras:
- Os tecidos intestinais de um animal morto recentemente precisam ser fixados em formol.
- As lesões são semelhantes a outras doenças.

Esfregaço de impressão

Detecta a presença de bactérias.
Tipos de amostra: tecido do intestino grosso e fezes.
Prós:
- Fácil de realizar.
  - Coloração inespecífica.
  - Microscopia de campo escuro.
- Um diagnóstico presuntivo pode ser feito pela detecção de um grande número de espiroquetas.
- Você pode identificar números baixos, moderados ou altos de bactérias presentes.
Contras:
- Requer a presença de um número significativamente maior de bactérias em comparação com cultura ou PCR.
- Não avalia a capacidade hemolítica dos isolados e, portanto, não diferencia cepas não patogênicas, colite espiroqueta e disenteria suína.

Reação em cadeia da polimerase (PCR)

Detecta a presença de uma sequência específica de ácido nucleico (DNA) bacteriano.
Tipos de amostras: tecido intestinal, swabs fecais, fezes.
Prós:
- Alta sensibilidade.
- A quantificação por PCR está associada à presença de lesões.
- Custo moderado.
  - Amostras de fezes ou tecidos geralmente podem ser agrupadas para reduzir custos e minimizar a perda de sensibilidade (especialmente no que diz respeito à relevância clínica).
Contras:
- Alta sensibilidade – confirma a presença de bactérias, mas não de doenças.
- Primers adequados são necessários para detectar e diferenciar entre Brachyspira spp.

Ensaio imunossorvente ligado a enzima (ELISA)

Detecta a presença de anticorpos.
Tipo de amostra: soro.
Prós:
- Você pode detectar a infecção no nível de granja.
- Os anticorpos podem durar vários meses.
- Os níveis séricos de IgG correlacionam-se com a duração dos sinais clínicos.
Contras:
- As evidências não estão prontamente disponíveis.
- Baixa sensibilidade e especificidade.
  - Eles são usados para detecção no nível da granja e não para diagnóstico de animais individuais.
- Os anticorpos específicos e o tempo de detecção podem variar ligeiramente entre os diferentes kits comerciais disponíveis.
- Frequentemente, os antígenos usados podem ser específicos para determinadas espécies de Brachyspira.
- Não há correlação entre níveis de anticorpos e proteção.
- Proteção cruzada entre Brachyspira spp.

Cultivo bacteriano

Positivo: bactéria presente.
- Beta-hemólise forte – disenteria suína.
- Beta-hemólise fraca – espiroqueta ou colite não patogênica.
Negativo: Negativo, animal possivelmente previamente tratado com antibióticos ou muito tarde na infecção.

Susceptibilidade antimicrobiana

Suscetível: possível boa escolha para tratamento se o antimicrobiano puder atingir o tecido-alvo.
Resistente: um antimicrobiano diferente deve ser selecionado.
MIC: se MIC (concentração inibitória mínima) for realizada, deve-se garantir que o antimicrobiano selecionado atinja o valor de MIC indicado no órgão-alvo.

Histopatologia

Positivo: Espiroquetas encontradas perto das lesões são um diagnóstico presuntivo.
Negativo: Sem lesões intestinais.

Esfregaço de impressão

Quantidade de espiroquetas presentes:
- Alto: altamente sugestivo de doença.
- Moderada: interpretação variável.
- Baixo: valor questionável (pode ser uma condição não patogênica ou crônica).
- Ausente: animal possivelmente previamente tratado com antibióticos ou contribuinte não significativo.

PCR

Positivo: confirma a presença de bactérias.
Negativo: Negativo ou infecção muito antiga para detectar a bactéria ou animal previamente tratado com antibióticos.

ELISA

Positivo: Exposição anterior (>2-4 semanas) à vacina ou bactéria de campo.
Negativo:
- Negativo para vacina ou bactéria de campo.
- Infecção muito antiga para ser detectada.
- O uso de antibióticos pode inibir o crescimento bacteriano e diminuir a resposta imune.

Suínos de terminação com diarreia (aguda)

Coletar amostras fecais de 10 ou mais suínos com diarreia não tratados com antibióticos e enviar para cultura bacteriana e PCR em pools de 5.
Necropsia 1-3 suínos mortos recentemente ou sacrificar animais com diarreia.
Avaliar o intestino grosso (especialmente o ceco e o cólon espiral) macroscopicamente e fixe em formalina para histopatologia.

História crônica de diagnóstico de disenteria suína, mas sem sinais clínicos observados

Coletar amostras de fezes de 4-6 baias e envie para PCR.
Coletar amostras de 15 a 20 suínos com 14 e 18 semanas de idade.
- Duas abordagens para a coleta:
  - Transversal – coleta de diferentes faixas etárias ao mesmo tempo (obtém resultados mais rapidamente).
  - Longitudinal – coleta dos mesmos suínos ao longo do tempo (são obtidos resultados mais precisos).
- Análise de amostras de soro por ELISA.