Quais frações do ejaculado devo incluir para preparar as doses de inseminação artificial?

Desde o desenvolvimento da inseminação artificial suína (IA), uma das questões mais levantadas tem sido qual fração ou frações do ejaculado devem ser incluídas nas doses de sêmen. Em geral, a fração rica do ejaculado tem sido a parte incluída nas doses, devido à crença de que a parte final do ejaculado (fração pós-espermática caracterizada pelo alto volume de plasma seminal e baixa concentração espermática) teve um efeito deletério na qualidade do esperma durante a manutenção da dose. É verdade que alguns estudos confirmaram esse fato, mas avaliando o efeito de cada fração do ejaculado separadamente (revisado por Höfner et al. 2020a), mas não avaliando o possível efeito sinérgico das diferentes frações como um todo na conservação das doses de sêmen, fertilidade e tamanho da prole. Para corroborar este fato, realizamos um estudo preparando 3 tipos diferentes de doses seminais de acordo com as frações incluídas durante a coleta do ejaculado: 1) Dose seminal F1: inclui a fração rica do ejaculado; 2) F2: F1 mais a fração de transição entre a fração rica e a fração pobre; 3) F3: F2 mais a fração pobre. Como de costume em cada coleta, a fração inicial do pré-espermatozóide foi descartada, assim como a fração filtrada. Após a coleta dos ejaculados, as doses de sêmen foram ajustadas para 2000x106 espermatozóides/60 ml com um diluente comercial e armazenadas a 16ºC por 3 dias. Após este período, a qualidade do sêmen foi analisada e, as IAs foram realizadas com as mesmas doses em matrizes multíparas (3-5 partos). O desenho experimental do estudo está resumido na Figura 1.

Os resultados da análise seminal mostraram que os 3 tipos de doses mantiveram uma qualidade espermática semelhante, sem que as frações ejaculadas incluídas afetassem qualquer parâmetro (vídeo 1). Embora seja verdade que a qualidade do esperma nem sempre é sinal de fertilidade adequada, os resultados das IAs mostraram que os dados de fertilidade e prolificidade também foram semelhantes entre os grupos experimentais, assim como os dados de crescimento e saúde (avaliados por meio de exames hematológicos e bioquímicos) em leitões.

Vídeo 1. Motilidade espermática nos diferentes tipos de doses de sêmen (F1, F2, F3) após 3 dias de armazenamento a 16ºC.

Os resultados do estudo indicam que a inclusão de todas as frações do ejaculado na preparação das doses de sêmen não implica em efeito adverso na preservação espermática ou nos rendimentos produtivos após a IA. Isto implica uma série de vantagens:

• Redução do diluente nas doses seminais: a fração pobre do ejaculado é caracterizada por ter um alto volume de plasma seminal. A inclusão desta fração nas doses seminais acarreta uma redução do diluente a ser adicionado, pois o volume é suprido pela fração pobre. Além de reduzir o custo do diluente por dose seminal, o uso de antibióticos em cada dose também é reduzido.
• Maior eficiência dos machos: o uso apenas das primeiras frações do ejaculado nas doses seminais significa que parte do material genético da última fração é descartada. Nosso estudo quantificou o número de doses seminais (2000x106/60 ml) em 32,3 usando F3, enquanto 26,0 foram preparadas com F1.
• Maior eficiência do operador: coletar todas as frações do ejaculado implica poder estabelecer a coleta semi-automática em centros de IA. Isso resulta em maior eficiência no trabalho dos operadores, pois podem realizar várias coletas simultaneamente.
• Produto final mais homogêneo e econômico: o uso de doses com F3 deriva um aumento na porcentagem de leitões (para cada 100 inseminações) em 2,47% em relação ao uso de doses F1. Esta medida contribui para o aumento da homogeneidade do produto e, portanto, para uma melhoria na precisão da produção.
• Vantagem econômica: realizando um estudo econômico onde foram incluídos custos fixos, custos variáveis, consumíveis, embalagens, diluente, água de osmose e PCR, estimou-se uma redução no custo de produção por dose de aproximadamente 20% da F3 em relação a F1. Esta redução de custo tem repercussões semelhantes no custo de produção do leitão nascido vivo, calculado em € 0,12 por leitão de acordo com os dados do estudo. Essa redução seria ainda mais notável em genética menos prolífica.

No entanto, e apesar dos resultados obtidos indicarem claramente a possibilidade de utilização de F3 em doses seminais, devemos também ter algumas possíveis limitações:

• Machos e linhagem genética: foram utilizados um total de 6 machos de fertilidade comprovada da mesma linhagem genética, cujo desempenho em conservação e fertilidade/prolificidade foi semelhante entre eles. No entanto, outros estudos mostraram diferenças na composição do plasma seminal entre machos e entre linhagens genéticas (Mills et al. 2020; Höfner et al. 2020b; Xu et al. 2021), de modo que o uso de outros machos pode levar a uma eficiência diferente na conservação de espermatozoides e desempenho reprodutivo do que a obtida no presente estudo.
• Tempo de armazenamento: no nosso caso comparamos o desempenho dos diferentes tipos de doses seminais aos 3 dias de armazenamento, mas em determinadas situações é necessário prolongar esta vida de prateleira, por isso é necessário realizar estudos complementares aumentando este período.
• Tipo de diluente: utilizamos um diluente de longa duração, mas existem muitos diluentes no mercado com características e composição diferentes, por isso seria adequado realizar um estudo semelhante comparando os diluentes comerciais mais utilizados.

Em resumo, evidenciamos o potencial uso do ejaculado inteiro na produção de suínos com as vantagens e desvantagens que isso acarreta. No entanto, recomenda-se antes de estabelecer esta prática em centros de IA, realizar testes iniciais de conservação das doses seminais com os machos selecionados, como foi realizado neste estudo, a fim de verificar a qualidade do esperma e a capacidade de otimizar os machos.

Projeto financiado pelo Ministério da Ciência e Inovação da Espanha (PID2019-106380RBI00 MCIN/AEI/10.13039/501100011033