Diagnóstico laboratorial: Salmonella

Testes disponíveis:

Cultivo bacteriano

• Isolamento de organismo vivo em tecidos com lesões.
• Tipos de amostras: fezes, sangue, fígado, pulmão, baço e linfonodos.
• Prós:
  • Bacteria são fáceis para crescer, 1 a 2 dias para casos agudos.
  • Fácil para realizar em qualquer laboratório (incluindo em casa)
  • Relativo custo baixo
• Contras:
  • O enriquecimento seletivo pode ser necessário para amostras de sangue.
  • Se os suínos foram previamente tratados com antibióticos, pode impedir o crescimento bacteriano.
  • As fezes não são confiáveis ​​para o diagnóstico de casos sistêmicos.
  • A excreção das bactérias não é constante; mas intermitente no tempo.

Susceptibilidade antimicrobiana (antibiograma)

• Teste in vitro: capacidade de um organismo vivo de crescer sob concentrações específicas de diferentes antimicrobianos.
• Tipos de amostra: fezes, sangue, baço, pulmão, fígado, gânglios linfáticos.
• Prós:
  • Identificação de suscetibilidade ou resistência de cepas específicas a antimicrobianos comuns.
  • Identificação de tendências de resistência antimicrobiana.
• Contras:
  • Requer um isolado bacteriano.
  • Os testes in vitro podem diferir ligeiramente dos resultados in vivo.
  • Alguns antimicrobianos específicos podem não estar listados ou podem exigir testes especiais separados.
  • Custo moderado.

Sorotipagem bacteriana

• O sorogrupo é baseado na identificação de diferentes antígenos O e H em isolados de Salmonella.
• Prós:
  • A sorotipagem pode ser feita por:
    • Uso de diferentes anti-soro.
    • Uma técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) que detecta a presença de sequências específicas de ácido nucleico (DNA) associadas a antígenos específicos.
    • Uso de microarranjos para detectar sequências de DNA específicas para antígenos específicos.
  • Ajuda a identificar a patogenicidade do isolado bacteriano com base na sorotipagem associada a antígenos específicos.
• Contras:
  • Requer um isolado bacteriano.
  • Custo moderado.

Ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA)

• Detecta a presença de anticorpos.
• Tipos de amostras: soro o fluidos orais.
• Prós:
  • Os animais permanecem positivos por várias semanas.
  • Pode ser usado em casos crônicos.
  • Amostras pareadas podem ser usadas para confirmar uma infecção recente.
• Contras:
  • Anticorpos específicos e tempo de detecção podem variar ligeiramente entre os vários kits comerciais disponíveis.
  • Pode variar de apenas 3 ou 4 dias a mais de 3 semanas para que os animais se tornem soropositivos; tempo variável para a soroconversão com base no sorotipo e na dose de exposição.
  • Não faz distinção entre vacinação e infecção por bactérias de campo.
  • Não há resposta sorológica consistente à infecção; diferentes sorotipos e diferentes doses de infecção influenciam a resposta imune.
  • Os anticorpos maternos podem complicar a interpretação dos resultados no início da transição.

Interpretação de resultados:

Cultivo bacteriano:

• Quantidade:
  • Moderado a alto: altamente sugestivo de que está contribuindo para a doença.
  • Baixo: valor questionável (pode ser um sorotipo contaminante ou não patogênico).
  • Sem crescimento: animal possivelmente tratado previamente com antibióticos, não está ocorrendo excreção naquele momento (excreção intermitente) ou a bactéria não está contribuindo para a doença.

Susceptibilidade antimicrobiana (antibiograma):

• Suscetível: possível boa escolha para tratamento se o antimicrobiano atingir o alvo.
• Resistente: um antimicrobiano diferente deve ser selecionado.
• CIM: caso seja realizada a CIM (concentração inibitória mínima), deve-se garantir que o antimicrobiano selecionado atinja o valor de CIM indicado no órgão alvo.

Sorotipagem:

• A sorotipagem permite o agrupamento por sorotipos, o que é muito valioso para identificar a importância do isolado.

Tabela com os sorotipos mais comuns de Salmonella e seus respectivos sorogrupos.

Grupo B	Grupo C1	Grupo D
Derby	Choleraesuis	Dublin
Heidelberg	Infantis	Enteritidis
Typhimurium	Newport

ELISA

• Positivo:
  • Exposição prévia a vacina ou bactérias de campo.
  • Amostras de soro pareadas com duas a três semanas de intervalo podem ser usadas para confirmar uma infecção recente.
• Negativo:
  • Negativo para vacina ou bactérias de campo.
  • Infecção muito recente para ser detectada.
  • Baixa dose de exposição.
  • Infecção com sorotipos leves.
  • O uso de antibióticos pode inibir o crescimento bacteriano, resultando em menor dose de exposição e menor resposta imune.

Hipóteses:

Suínos de terminação com diarreia (aguda ou crônica):

• Coletar amostras fecais de 10 ou mais suínos com diarreia não tratados com antibióticos e submetê-los para cultura bacteriana e sensibilidade em pools de 5.
• Enviar amostras positivas para Salmonella para sorotipagem.

Suínos de terminação com enfermidade sistêmica (com ou sem diarreia):

• Necropsia 1-3 suínos com diarreia que morreram recentemente ou realizar a eutanásia. Coletar amostras de tecido para cultura bacteriana (baço, fígado, linfonodos gastro-hepáticos).

Determinação do tempo de exposição:

• Coletar amostras de 10-15 suínos com 8, 12, 16 e 20 semanas de idade:
  • Duas abordagens para amostragem:
    • Transversal – coleta de diferentes faixas etárias ao mesmo tempo (os resultados são obtidos mais rapidamente).
    • Longitudinal – coleta dos mesmos suínos ao longo do tempo (são obtidos resultados mais precisos para interpretação serológica).
• Análise individual de amostras de soro por ELISA.
• Enviar amostras fecais para cultura bacteriana e sensibilidade em pools de 5 de acordo com a faixa etária.
• Enviar amostras positivas para Salmonella para sorotipagem.