Diagnóstico laboratorial: Peste Suína Clássica (PSC)

Testes disponíveis

Reação em cadeia de polimerase (PCR)

• Detecta a presença de sequências específicas do ácido nucleico viral (RNA).
• Tipos de amostra: soro ou tecidos.
• Prós:
  • Método mais sensível e preferido de detecção do agente.
  • Muitas vezes, as amostras podem ser agrupadas para reduzir custos e minimizar a perda de sensibilidade.
• Contras:
  • Custo moderado.
  • Requer primers adequados.

Anticorpos fluorescentes (FAT)

• Detecta a presença do vírus
• Tipos de amostras: tecidos, especialmente amígdalas.
• Prós:
  • Boa sensibilidade.
• Contras:
  • Não faz distinção entre vacinação e infecção por vírus de campo.
    • As vacinas vivas modificadas podem dar um FAT positivo por cerca de 2 semanas.
  • Não é viável para um grande número de amostras.
  • Os resultados dependem da cepa viral usada no teste.
  • A confiabilidade depende muito da habilidade dos técnicos.

Imunoperoxidase diferencial usando anticorpos monoclonais (MAbs)

• Detecta a presença do agente.
• Tipos de amostra: amígdala ou outro órgão FAT-positivo.
• Utiliza uma série de três anticorpos monoclonais (MAbs) diferentes para distinguir entre vacinação, infecção por vírus de campo e outros Pestivírus.
• Prós:
  • Permite distinguir entre vacinação, infecção por vírus de campo e outros pestivírus.
• Contras:
  • Custo moderado a alto.
  • Requer uma amostra de tecido FAT positiva.
  • Os resultados dependem dos três MAbs diferentes e um anticorpo policlonal (PAbs) usado no teste.
    • MAbs que reconhecem todas as cepas virais da PSC..
    • MAbs que reconhecem todas as cepas de vacina de PSC usadas naquele país.
    • MAbs que reconhecem o vírus da diarreia bovina (BVD) e a doença de fronteira (BD).
    • PAbs que reconhecem PSC..
  • Não é viável para um grande número de amostras.
  • A confiabilidade depende muito da habilidade dos técnicos.

Ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA)

• Detecta a presença de anticorpos.
• Tipos de amostra: soro.
• Prós:
  • Os animais permanecem positivos por várias semanas.
  • Pode ser usado em casos crônicos.
  • Pode ser usado para diferenciar a exposição o vírus de campo do vírus da vacina com deleção de genes.
  • Qualquer resultado positivo para vírus de campo é considerado significativo.
• Contras:
  • Se possível, o ensaio apropriado deve ser compatível com a deleção do gene apropriado na vacina (geralmente E2).
  • Os animais levam pelo menos 21 dias para se tornarem soropositivos.
  • Pode ocorrer reatividade cruzada com outros pestivírus.

Neutralização viral (VN)

• Detecta a presença de anticorpos.
• Tipos de amostra: soro.
• Prós:
  • Os animais permanecem positivos por várias semanas.
  • Pode ser usado em casos crônicos.
  • Sensibilidade superior ao ELISA (pode detectar uma concentração mais baixa de anticorpos).
• Contras:
  • Não é viável para um grande número de amostras.
  • Os animais levam pelo menos 21 dias para se tornarem soropositivos.
  • Não faz distinção entre vacinação e infecção por vírus de campo.
  • A confiabilidade depende muito da habilidade dos técnicos.
  • A reatividade depende da cepa viral utilizada.
  • Pode ocorrer reatividade cruzada com outros pestivírus.

Interpretação de resultados:

PCR

• Positivo: Vírus de campo ou cepa de vacina está presente.
• Negativo: Negativo ou o vírus não é detectado se o teste for feito muito tempo após a infecção.

FAT

• Positivo: Vírus de campo ou cepa de vacina está presente.
• Negativo: Negativo ou o vírus não é detectado se o teste for feito muito tempo após a infecção.

Imunoperoxidase com MAbs

• Positivo: Consulte a tabela 1.
• Negativo: Negativo ou o vírus não é detectado se o teste for feito muito tempo após a infecção.

Tabela 1. Interpretação dos resultados do teste de imunoperoxidase diferencial com anticorpos monoclonais (MAbs). Fonte: OIE.

Anticorpo policlonal	Anticorpo monoclonal específico para			Interpretação
	Cepa PSC	Cepa vacinal PSC	Cepa BVD/BD
+	+	—	—	cepa de campo de PSC
+	+	+	—	cepa vacinal de PSC
+	—	—	+	cepa de BVD/BV
+	—	—	—	Outros vírus não PSC Pestivírus*

* A existência de novas cepas de PSC deve sempre ser levada em consideração e quaisquer isolados de casos suspeitos de PSC devem ser encaminhados a um Laboratório de Referência da OIE.

ELISA

• Positivo: Anticorpos maternos ou exposição anterior (>21 dias) à vacina ou vírus de campo.
• Negativo: Negativo ou exposição à vacina ou vírus de campo muito recente para ser detectado.

A Tabela 2 ajuda a demonstrar as capacidades DIVA (diferenciação de animais infectados de vacinados) de alguns ensaios ELISA quando uma vacina com exclusão de genes é usada.

ELISA não diferencial	Resultado ELISA-E2	Interpretação
Positivo	Positivo	Animal exposto ao vírus de campo
Positivo	Negativo	Animal vacinado não exposto ao vírus de campo
Negativo	Positivo	Erro no ensaio, este resultado não é possível
Negativo	Negativo	Animal não vacinado e não exposto ao vírus de campo

VN

• Positivo: Anticorpos maternos ou exposição anterior (>21 dias) à vacina ou vírus de campo.
• Negativo: Negativo ou exposição à vacina ou vírus de campo muito recente para ser detectado.

Situações

É importante notar que alguns países podem exigir a aprovação da autoridade competente antes que qualquer teste do PSC possa ser realizado.

Suspeita de surto agudo de PSC em suínos de qualquer idade e granjas não vacinadas contra PSC

• Coletar sangue de vários animais afetados e analisar por PCR; o agrupamento de amostras pode ser considerado.
• Coletar baços e amígdalas de suínos que morreram e analisar por PCR; o agrupamento de amostras pode ser considerado.

Suspeita de surto agudo de PSC em suínos de qualquer idade em granjas vacinadas contra PSC

• Coletar sangue de vários animais afetados que não foram vacinados contra PSC nas últimas 2 semanas e analisar por PCR; o agrupamento de amostras pode ser considerado.
• Coletar baços ou tecidos e amígdalas de suínos que morreram e analisar por PCR; o agrupamento de amostras pode ser considerado.
  • Se o PCR for positivo, teste a amostra de tecido usando FAT e imunoperoxidase com MAbs.

Suspeita de circulação crônica de PSC em suínos de qualquer idade sem mortalidade e granjas não vacinadas contra PSC

• Coletar sangue de 30 suínos com sinais clínicos (amostragem direcionada) ou selecionados aleatoriamente (sem sinais clínicos) e analisar por PCR (pool pode ser considerado) e individualmente por ELISA não diferencial.

Suspeita de circulação crônica de PSC em suínos de qualquer idade sem mortalidade e granjas vacinadas contra PSC

• Coletar sangue de 30 suínos (não vacinados nas últimas 2 semanas) com sinais clínicos (amostragem direcionada) ou selecionados aleatoriamente (sem sinais clínicos) e analisar por PCR (pool pode ser considerado) e individualmente por ELISA não diferencial e ELISA diferencial E2.