Diagnóstico laboratorial: Peste suína africana

Testes disponíveis:

O gráfico abaixo mostra as mudanças na concentração (eixo Y) ao longo do tempo (eixo X) dos diferentes componentes de uma amostra usada ​​nos ensaios. Após a exposição, a presença do vírus no sangue (viremia) aparecerá em 1 ou 2 dias e durará 3-4 semanas. A soroconversão (detecção de anticorpos) geralmente ocorre em até 14 dias após a exposição e dura muitos meses ou anos.

Reação em cadeia de polimerase (PCR)

• Detecta a presença de sequências específicas de ácido nucleico (DNA) viral.
• Tipos de amostras: soro, sangue ou tecidos.
• Prós:
  • Método mais sensível e preferido para detectar o agente.
  • Custo moderado:
    • Frequentemente, as amostras podem ser agrupadas para reduzir custos e minimizar a perda de sensibilidade.
• Contras:
  • Requer primers adequados.

Hemadsorção (HAT)

• Detecta a presença de vírus através da ligação de eritrócitos à membrana externa (citoplasmática) de macrófagos suínos infectados com o vírus PSA.
• Tipos de amostras: soro e plasma.
• Prós:
  • Um dos testes padrão de referência.
• Contras:
  • Algumas cepas do ambiente não induzem hemadsorção e resultados negativos geralmente requerem confirmação por PCR.

Ensaio de imunoabsorção enzimática de detecção de antígeno (Ag-ELISA)

• Detecta a presença do agente.
• Tipos de amostra: geralmente sangue e possivelmente outros tecidos específicos (siga as recomendações do kit).
• Prós:
  • Kits comerciais disponíveis.
  • Relativamente barato.
• Contras:
  • Menos sensível que o PCR.
  • O agrupamento de amostras não é recomendado.
  • Os resultados negativos geralmente requerem confirmação por PCR.

Ensaio de imunoabsorção enzimática de detecção de anticorpos (Ab-ELISA)

• Detecta a presença de anticorpos.
• Tipos de amostras: soro ou plasma.
• Prós:
  • Os animais permanecem positivos por vários meses ou anos.
  • Pode ser usado em casos crônicos.
  • Pode ser usado em casos de baixa virulência / subclínicos.
  • A soroconversão geralmente ocorre em 7 a 10 dias.
  • Atualmente não existem vacinas comerciais disponíveis que confundam a interpretação dos resultados.
• Contras:
  • Demora 7 a 10 dias para os animais se tornarem soropositivos.
  • Não faz distinção entre anticorpos maternos e exposição.

Anticorpos fluorescentes indiretos (IFA)

• Detecta a presença de anticorpos.
• Tipos de amostras: soro ou plasma.
• Prós:
  • Teste de confirmação em amostras positivas no teste ELISA.
• Contras:
  • Os animais precisam estar infectados há pelo menos 1 semana.
  • Não é viável para um grande número de amostras.
  • Os resultados dependem da cepa do vírus usada no teste.
  • A confiabilidade é altamente dependente da habilidade dos técnicos que executam o teste.

Imunoperoxidase indireta (IPT)

• Procura a presença de anticorpos.
• Tipos de amostra: soro ou plasma.
• Prós:
  • Teste de confirmação em amostras positivas no teste ELISA.
• Contras:
  • Os animais precisam estar infectados há pelo menos 1 semana.
  • Não é viável para um grande número de amostras.
  • Os resultados dependem da cepa do vírus usada no teste.
  • A confiabilidade é altamente dependente da habilidade dos técnicos que executam o teste.

Interpretação de resultados:

Normalmente, vários testes são necessários para fornecer uma melhor interpretação do diagnóstico de PSA.

Tabela 1. Interpretação dos resultados diagnósticos da PSA. Fonte: Laboratório de Referência da União Europeia para a Peste Suína Africana.

Testes	Resultado	Cenários mais prováveis
PCR	Fraco (Ct>35)	O animal foi infectado recentemente e ainda não foi soroconvertido (<7 dias). Os sinais clínicos podem não ser específicos.
Ab-ELISA	Negativo
IPT	Negativo
PCR	Positivo	O animal foi infectado recentemente, apresenta sinais clínicos e inicia soroconversão (7 a 10 dias).
Ab-ELISA	Negativo
IPT	Positivo
PCR	Positivo	a) Infecção contínua. O animal permanece virêmico com sinais clínicos e já soroconvertido (> 10 dias). b) Reinfecção de um animal com anticorpos pré-formados de uma infecção anterior (suíno recuperado, sobrevivente). O título do IPT fornecerá informações sobre o momento da infecção.
Ab-ELISA	Positivo
IPT	Positivo
PCR	Fraco (Ct>35) ou Negativo	a) Infecção passada. O animal se recuperou de infecção aguda ou subaguda e pode não apresentar sinais clínicos. b) O animal estava infectado com uma cepa atenuada (com ou sem sinais clínicos). c) Reinfecção de um animal com anticorpos pré-formados de uma infecção anterior (suíno recuperado, sobrevivente). O título IPT oferecerá informações sobre o momento da infecção.
Ab-ELISA	Positivo
IPT	Positivo

PCR

• Positivo: O vírus está presente; infecção atual.
• Negativo: Negativo ou o vírus não é detectado se o teste for feito muito tempo após a infecção.

HAT

• Positivo: O vírus está presente; infecção atual.
• Negativo: Negativo, infecção por uma cepa não hemadsorvente ou o vírus não é detectado se o teste for realizado muito tempo após a infecção. O negativo deve ser confirmado por PCR.

Ag-ELISA

• Positivo: O vírus está presente; infecção atual.
• Negativo: Negativo, vírus presente, mas em baixas concentrações, ou vírus não detectado se o teste for feito muito tempo após a infecção. O negativo deve ser confirmado por PCR.

Ab-ELISA

• Positivo: Anticorpos maternos ou exposição anterior (> 7-10 dias) ao vírus.
• Negativo: Negativo ou infecção muito recente para ser detectada.

IFA

• Positivo: Anticorpos maternos ou exposição anterior (> 7-10 dias) ao vírus.
• Negativo: Negativo ou infecção muito recente para ser detectada.

IPT

• Positivo: Anticorpos maternos ou exposição anterior (> 7-10 dias) ao vírus.
• Negativo: Negativo ou infecção muito recente para ser detectada.

Cenários:

É importante ressaltar que alguns países podem exigir a aprovação da autoridade competente antes que seja realizado qualquer teste de PSA .

Suspeita de surto agudo de PSA em suínos de qualquer idade

• Coletar sangue de vários animais afetados e analisar pelo teste de PCR; pode considerar o agrupamento de amostras.
• Coletar fragmentos de baços e amígdalas de suínos que morreram e analisar pelo teste de PCR; pode considerar o agrupamento de amostras.

Suspeita de circulação crônica de PSA em suínos de qualquer idade sem mortalidade

• Coletar sangue de 30 suínos com sinais clínicos (amostragem direcionada) ou selecionados aleatoriamente (sem sinais clínicos) e analisar por PCR (agrupamento de amostras pode ser considerado) e individualmente por Ab-ELISA.